DNA Fingerprinting Questions in Hindi

(C) $1980$ में,फ्रेडरिक सेंगर,वाल्टर गिल्बर्ट और एलन मैक्सम को न्यूक्लिक एसिड में क्षार अनुक्रम (base sequences) के निर्धारण में उनके योगदान के लिए रसायन विज्ञान में नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया था। विशेष रूप से,सेंगर ने 'डाईडिऑक्सी चेन-टर्मिनेशन' विधि विकसित की,जबकि गिल्बर्ट और मैक्सम ने 'रासायनिक क्षरण' (chemical degradation) विधि विकसित की। इन तकनीकों का उपयोग मुख्य रूप से वायरस के $DNA$ के न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम को निर्धारित करने के लिए किया गया था,जैसे कि बैक्टीरियोफेज $\phi X174$।

(B) सही उत्तर $B$ है। कैस्परसन $(1970)$ ने विशिष्ट फ्लोरोसेंट रंगों का उपयोग करके गुणसूत्रों को अभिरंजित करने की एक विधि विकसित की। यह तकनीक गुणसूत्रों की लंबाई के साथ अलग-अलग हल्के और गहरे बैंड उत्पन्न करती है,जिन्हें बैंडिंग पैटर्न के रूप में जाना जाता है। ये पैटर्न व्यक्तिगत गुणसूत्रों की पहचान करने और विभिन्न प्रकार की गुणसूत्रीय असामान्यताओं का पता लगाने के लिए बहुत उपयोगी हैं।

(D) सैटेलाइट $DNA$ उन अत्यधिक पुनरावृत्त $DNA$ अनुक्रमों को संदर्भित करता है जो गुणसूत्रों के हेटरोक्रोमैटिक क्षेत्रों में पाए जाते हैं। साइटोजेनेटिक्स में,'सैटेलाइट' शब्द उस छोटे गुणसूत्रीय खंड को भी संदर्भित करता है जो द्वितीयक संकुचन (secondary constriction) द्वारा गुणसूत्र के मुख्य भाग से अलग होता है। इसलिए,सैटेलाइट $DNA$ भौतिक रूप से गुणसूत्रों के भीतर स्थित होता है।

(D) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग एक तकनीक है जिसका उपयोग व्यक्तियों की आनुवंशिक संरचना द्वारा उनकी पहचान करने के लिए किया जाता है।
$1$. इसका उपयोग फोरेंसिक विज्ञान में अपराध स्थलों से प्राप्त $DNA$ नमूनों का मिलान करके अपराधियों की पहचान करने के लिए किया जाता है।
$2$. इसका उपयोग पितृत्व और मातृत्व परीक्षणों में जैविक संबंधों को स्थापित करने के लिए किया जाता है।
$3$. यह $DNA$ पॉलीमॉर्फिज्म (बहुरूपता) के विश्लेषण पर निर्भर करता है,जो व्यक्तियों के बीच $DNA$ अनुक्रमों में भिन्नता को संदर्भित करता है।
अतः,दिए गए सभी विकल्प $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग के सही अनुप्रयोग हैं।

(C) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग एक आधुनिक प्रयोगशाला तकनीक है जिसका उपयोग किसी व्यक्ति की $DNA$ प्रोफाइल का विश्लेषण करके उसकी पहचान निर्धारित करने के लिए किया जाता है।
इसमें न्यूक्लियोटाइड्स के विशिष्ट अनुक्रमों की पहचान की जाती है जो प्रत्येक व्यक्ति के लिए अद्वितीय होते हैं,जिन्हें अक्सर वेरिएबल नंबर टैंडम रिपीट्स $(VNTRs)$ के रूप में जाना जाता है।
इन प्रोफाइलों की तुलना फोरेंसिक जांच,पितृत्व परीक्षण और आनुवंशिक अध्ययनों में व्यक्तियों की पहचान करने के लिए की जाती है।
इसलिए,यह $DNA$ नमूनों की प्रोफाइल का आणविक विश्लेषण है।

(A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग तकनीक सबसे पहले $1984$ में एलेक जेफ्रीस द्वारा विकसित की गई थी। उन्होंने प्रोब के रूप में सैटेलाइट $DNA$ का उपयोग किया जो बहुत उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) प्रदर्शित करता है और इसे वेरिएबल नंबर टैंडम रिपीट्स ($VNTR$s) कहा जाता है।

(D) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग एक तकनीक है जिसका उपयोग व्यक्तियों की उनके अद्वितीय $DNA$ अनुक्रमों के आधार पर पहचान करने के लिए किया जाता है।
$1$. इसका उपयोग फोरेंसिक विज्ञान में अपराध स्थलों से प्राप्त $DNA$ नमूनों का मिलान करके संदिग्धों या पीड़ितों की पहचान करने के लिए व्यापक रूप से किया जाता है।
$2$. इसका उपयोग पितृत्व और मातृत्व परीक्षण में जैविक संबंधों को स्थापित करने के लिए किया जाता है।
$3$. यह $DNA$ पॉलीमॉर्फिज्म (बहुरूपता) के विश्लेषण पर निर्भर करता है,जो व्यक्तियों के बीच $DNA$ अनुक्रमों में भिन्नता को संदर्भित करता है।
इसलिए,दिए गए सभी विकल्प $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग के सही अनुप्रयोग हैं।

(C) गलत कथन $C$ है। $VNTR$ (Variable Number Tandem Repeats) वास्तव में मिनीसेटेलाइट से जुड़े होते हैं,न कि माइक्रोसेटेलाइट से। माइक्रोसेटेलाइट आमतौर पर छोटी अनुक्रम ($1-6$ बेस पेयर) होते हैं जो दोहराते हैं,जबकि $VNTR$ लंबी दोहराव इकाइयों वाले मिनीसेटेलाइट होते हैं। विकल्प $A$ सही है क्योंकि $PCR$ (Polymerase Chain Reaction) एक कोशिका से $DNA$ के प्रवर्धन (amplification) की अनुमति देता है। विकल्प $B$ सही है क्योंकि $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग आनुवंशिक विविधता के अध्ययन के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है। विकल्प $D$ सही है क्योंकि समान (मोनोजायगोटिक) जुड़वां बच्चों के मामले को छोड़कर $DNA$ अनुक्रम प्रत्येक व्यक्ति के लिए अद्वितीय होते हैं।

(B) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग व्यक्तियों को उनकी $DNA$ प्रोफाइल के आधार पर पहचानने के लिए किया जाता है। इसमें न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों में भिन्नता का पता लगाने के लिए $DNA$ नमूनों का आणविक विश्लेषण किया जाता है,जो विशेष रूप से $VNTRs$ (Variable Number Tandem Repeats) नामक दोहराव वाले अनुक्रमों पर केंद्रित होता है। इन पैटर्न की तुलना करके,वैज्ञानिक पहचान या जैविक संबंधों को स्थापित कर सकते हैं। इसलिए,इसे $DNA$ नमूनों की प्रोफाइल के आणविक विश्लेषण के रूप में परिभाषित किया जाता है।

(B) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग की प्रक्रिया में कई चरण शामिल होते हैं: $DNA$ का पृथक्करण,रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज द्वारा $DNA$ का पाचन,जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा $DNA$ के टुकड़ों का पृथक्करण,सदर्न ब्लॉटिंग और लेबल किए गए $VNTR$ प्रोब्स का उपयोग करके संकरण।
विकल्प $B$ गलत है क्योंकि $DNA$ का पाचन रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज द्वारा किया जाता है,न कि $DNA$ लाइपेज द्वारा। लाइपेज वे एंजाइम हैं जो लिपिड को तोड़ते हैं,$DNA$ को नहीं।

(B) $PCR$ (पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन) और $RFLP$ (रिस्ट्रिक्शन फ्रैगमेंट लेंथ पॉलीमॉर्फिज्म) जेनेटिक फिंगरप्रिंटिंग में उपयोग की जाने वाली मूलभूत तकनीकें हैं।
$PCR$ का उपयोग $DNA$ नमूनों की अल्प मात्रा को प्रवर्धित (amplify) करने के लिए किया जाता है ताकि विश्लेषण के लिए पर्याप्त सामग्री प्राप्त हो सके।
$RFLP$ में $DNA$ को रिस्ट्रिक्शन एंजाइमों द्वारा काटकर विभिन्न लंबाई के टुकड़े बनाए जाते हैं,जिन्हें जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा अलग करके एक व्यक्ति के लिए एक अद्वितीय पैटर्न बनाया जाता है।
ये तकनीकें मिलकर व्यक्ति के अद्वितीय आनुवंशिक मेकअप के आधार पर उनकी पहचान करने की अनुमति देती हैं,जो जेनेटिक फिंगरप्रिंटिंग का आधार है।

(B) एगारोज़ जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा अलग किए गए $DNA$ के टुकड़ों को नाइट्रोसेल्यूलोज या नायलॉन जैसी कृत्रिम झिल्ली पर स्थानांतरित करने की तकनीक को सदर्न ब्लॉटिंग कहा जाता है।
यह प्रक्रिया $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग और $DNA$ विश्लेषण का एक महत्वपूर्ण चरण है।
इसके विपरीत,नॉर्दर्न ब्लॉटिंग का उपयोग $RNA$ के स्थानांतरण के लिए किया जाता है और वेस्टर्न ब्लॉटिंग का उपयोग प्रोटीन के स्थानांतरण के लिए किया जाता है।

(D) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में $DNA$ का अलगाव,रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज द्वारा $DNA$ का पाचन,इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा $DNA$ के टुकड़ों का पृथक्करण,ब्लॉटिंग,लेबल किए गए $VNTR$ प्रोब्स का उपयोग करके हाइब्रिडाइजेशन और ऑटोरेडियोग्राफी द्वारा पहचान जैसे विभिन्न चरण शामिल हैं।
$1$. रिस्ट्रिक्शन एंजाइम का उपयोग $DNA$ को विशिष्ट टुकड़ों में काटने के लिए किया जाता है।
$2$. $Taq$ पॉलीमरेज़ का उपयोग $PCR$ (पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन) चरण में $DNA$ नमूनों को एम्प्लीफाई करने के लिए किया जाता है।
$3$. ओलिगोन्यूक्लियोटाइड प्राइमर्स $PCR$ प्रक्रिया के लिए $DNA$ की नई श्रृंखलाओं के संश्लेषण को शुरू करने के लिए आवश्यक हैं।
इसलिए,$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग तकनीक में ऊपर सूचीबद्ध सभी घटकों का उपयोग किया जाता है।

(D) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में कई चरण शामिल होते हैं: $DNA$ का पृथक्करण,रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज द्वारा $DNA$ का पाचन,जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा $DNA$ के टुकड़ों का पृथक्करण,अलग किए गए $DNA$ के टुकड़ों को नाइट्रोसेल्यूलोज या नायलॉन जैसी सिंथेटिक झिल्लियों पर स्थानांतरित (ब्लॉटिंग) करना,और लेबल किए गए $VNTR$ प्रोब का उपयोग करके हाइब्रिडाइजेशन।
सदर्न ब्लॉटिंग $DNA$ के टुकड़ों को झिल्ली पर स्थानांतरित करने के लिए उपयोग की जाने वाली तकनीक है।
नदर्न ब्लॉटिंग एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग नमूने में विशिष्ट $RNA$ अनुक्रमों का पता लगाने के लिए किया जाता है,न कि $DNA$ के लिए। इसलिए,यह $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का चरण नहीं है।

(D) $DNA$ फिंगर प्रिंटिंग और $DNA$ प्रोफाइलिंग एक ही वैज्ञानिक तकनीक के लिए उपयोग किए जाने वाले दो शब्द हैं।
इस तकनीक में किसी व्यक्ति की पहचान करने के लिए उनके $DNA$ अनुक्रमों के अद्वितीय पैटर्न का विश्लेषण किया जाता है।
इसका उपयोग फोरेंसिक विज्ञान,पितृत्व परीक्षण और आनुवंशिक अनुसंधान में व्यापक रूप से किया जाता है।
अन्य विकल्प अलग-अलग जैविक अवधारणाओं को दर्शाते हैं: जीन पूल एक आबादी में कुल आनुवंशिक विविधता को संदर्भित करता है,जबकि जीनोम एक जीव में आनुवंशिक सामग्री का पूरा सेट है।
कोडोन तीन न्यूक्लियोटाइड के अनुक्रम हैं जो विशिष्ट अमीनो एसिड के लिए कोड करते हैं,जबकि जीन आनुवंशिकता की एक कार्यात्मक इकाई है।
सिस्ट्रोन $DNA$ या $RNA$ का एक खंड है जो एक विशिष्ट पॉलीपेप्टाइड के लिए कोड करता है,जबकि ट्रिपलेट स्वयं तीन-न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम (कोडोन) को संदर्भित करता है।

(A) सैटेलाइट $DNA$ में $DNA$ के अत्यधिक दोहराव वाले अनुक्रम होते हैं जो प्रोटीन के लिए कूटलेखन (coding) नहीं करते हैं।
ये अनुक्रम उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) प्रदर्शित करते हैं,जिसका अर्थ है कि वे व्यक्तियों के बीच काफी भिन्न होते हैं।
चूंकि ये विविधताएं प्रत्येक व्यक्ति के लिए अद्वितीय होती हैं,इसलिए सैटेलाइट $DNA$ ही $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का मूल आधार है।
$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का उपयोग फोरेंसिक विज्ञान में आपराधिक जांच,पितृत्व परीक्षण और व्यक्तियों की पहचान के लिए व्यापक रूप से किया जाता है।

(B) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग $DNA$ बहुरूपता (polymorphism) के सिद्धांत पर आधारित है।
$DNA$ बहुरूपता का अर्थ आनुवंशिक स्तर पर पाई जाने वाली विविधता है।
विशेष रूप से,यह $DNA$ अनुक्रमों पर निर्भर करता है जिन्हें वेरिएबल नंबर टैंडम रिपीट्स $(VNTRs)$ के रूप में जाना जाता है।
ये $VNTRs$ छोटे न्यूक्लियोटाइड रिपीट्स होते हैं जो प्रत्येक व्यक्ति के लिए अत्यधिक विशिष्ट होते हैं और उच्च स्तर की बहुरूपता प्रदर्शित करते हैं,जो $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का आधार है।

(A) डेन्सिटी ग्रेडिएंट सेंट्रीफ्यूजेशन में,बल्क $DNA$ जीनोम का अधिकांश भाग होता है और एक बड़ा शिखर बनाता है जिसे $Major$ $peak$ (मुख्य शिखर) कहा जाता है।
सैटेलाइट $DNA$ में अत्यधिक पुनरावृत्ति वाले अनुक्रम होते हैं जिनका घनत्व बल्क $DNA$ से भिन्न होता है,इसलिए यह एक या अधिक छोटे शिखर बनाता है जिन्हें $Minor$ $peaks$ (गौण शिखर) कहा जाता है।

(B) $DNA$ फिंगर प्रिंटिंग एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग व्यक्तियों की अद्वितीय $DNA$ अनुक्रमों के आधार पर उनकी पहचान करने के लिए किया जाता है। इसे $1984$ में लेस्टर विश्वविद्यालय में सर एलेक जेफ्री द्वारा विकसित किया गया था। यह तकनीक वेरिएबल नंबर टैंडम रिपीट्स $(VNTRs)$ के विश्लेषण पर निर्भर करती है,जो $DNA$ के विशिष्ट अनुक्रम हैं जो अलग-अलग व्यक्तियों में अलग-अलग संख्या में दोहराए जाते हैं।

(D) $DNA$ प्रोब $DNA$ या $RNA$ की एकल-रज्जुक (single-stranded) श्रृंखलाएं होती हैं जिन्हें रेडियोधर्मी या फ्लोरोसेंट मार्कर के साथ लेबल किया जाता है। इनका उपयोग संकरण (hybridization) द्वारा पूरक न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों की उपस्थिति का पता लगाने के लिए किया जाता है।
$1$. $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में,प्रोब का उपयोग विशिष्ट $VNTRs$ (वेरिएबल नंबर टैंडम रिपीट्स) की पहचान करने के लिए किया जाता है।
$2$. चिकित्सा निदान में,इनका उपयोग रोगजनक बैक्टीरिया या वायरस के अद्वितीय आनुवंशिक अनुक्रमों की पहचान करके उन्हें खोजने के लिए किया जाता है।
$3$. मेडिकल जेनेटिक्स में,इनका उपयोग आनुवंशिक विकारों से जुड़े विशिष्ट जीन या उत्परिवर्तन (mutations) की जांच करने के लिए किया जाता है।
अतः,दिए गए सभी विकल्प $DNA$ प्रोब के सही अनुप्रयोग हैं।

(D) : सैटेलाइट $DNA$ पुनरावृत्ति $DNA$ का वह हिस्सा है जिसमें लंबे पुनरावृत्ति न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम होते हैं,जो घनत्व अल्ट्रासेंट्रीफ्यूजेशन के दौरान एक अलग अंश बनाते हैं।
$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में $DNA$ अनुक्रम के कुछ विशिष्ट क्षेत्रों में अंतर की पहचान करना शामिल है जिसे पुनरावृत्ति $DNA$ कहा जाता है,क्योंकि इन अनुक्रमों में $DNA$ का एक छोटा हिस्सा कई बार दोहराया जाता है।
ये पुनरावृत्ति $DNA$ अनुक्रम घनत्व प्रवणता सेंट्रीफ्यूजेशन के दौरान मुख्य जीनोमिक $DNA$ से अलग चोटियों के रूप में अलग हो जाते हैं।
मुख्य $DNA$ एक बड़ा शिखर बनाता है और अन्य छोटी चोटियों को सैटेलाइट $DNA$ के रूप में जाना जाता है।
आधार संरचना ($A:T$ समृद्ध या $G:C$ समृद्ध),खंड की लंबाई और पुनरावृत्ति इकाइयों की संख्या के आधार पर,सैटेलाइट $DNA$ को कई श्रेणियों में वर्गीकृत किया जाता है,जैसे कि माइक्रोसेटेलाइट्स,मिनीसेटेलाइट्स आदि।
ये अनुक्रम सामान्य रूप से किसी भी प्रोटीन के लिए कोड नहीं करते हैं,लेकिन वे मानव जीनोम का एक बड़ा हिस्सा बनाते हैं।
ये अनुक्रम उच्च स्तर की बहुरूपता दिखाते हैं और $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का आधार बनते हैं।
चूंकि एक व्यक्ति के प्रत्येक ऊतक (जैसे रक्त,बालों के रोम,त्वचा,हड्डी,लार,शुक्राणु आदि) से $DNA$ समान स्तर की बहुरूपता दिखाता है,इसलिए वे फोरेंसिक अनुप्रयोगों में बहुत उपयोगी पहचान उपकरण बन जाते हैं।

(A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग $DNA$ अनुक्रम के विशिष्ट क्षेत्रों में अंतर की पहचान करने पर निर्भर करती है,जिन्हें पुनरावृत्त $DNA$ कहा जाता है।
विशेष रूप से,यह तकनीक वेरिएबल नंबर टैंडम रिपीट्स $(VNTRs)$ पर केंद्रित है।
ये छोटे न्यूक्लियोटाइड दोहराव हैं जो व्यक्ति-दर-व्यक्ति भिन्न होते हैं,जो उन्हें अत्यधिक बहुरूपी बनाते हैं और व्यक्तिगत पहचान के लिए आदर्श बनाते हैं।

(D) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग $DNA$ के उन विशिष्ट क्षेत्रों के न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों को निर्धारित करने की एक तकनीक है जो प्रत्येक व्यक्ति के लिए अद्वितीय होते हैं।
लगभग $0.1\%$ या $3 \times 10^6$ बेस पेयर का अंतर ($3 \times 10^9 \ bp$ में से) प्रत्येक मनुष्य को विशिष्टता प्रदान करता है।
मानव जीनोम में कई छोटे,गैर-कोडिंग लेकिन वंशानुगत बेस अनुक्रम होते हैं जो कई बार दोहराए जाते हैं। ये अनुक्रम टेलोमेरेस,सेंट्रोमेरेस,$Y$ गुणसूत्र और हेटरोक्रोमैटिक क्षेत्र के पास पाए जाते हैं।
एक ही बेस अनुक्रम के कई बार दोहराए जाने वाले क्षेत्र को पुनरावृत्ति $DNA$ (repetitive $DNA$) कहा जाता है। घनत्व प्रवणता सेंट्रीफ्यूजेशन के दौरान यह मुख्य $DNA$ से एक सैटेलाइट के रूप में अलग हो जाता है,इसलिए इसे सैटेलाइट $DNA$ कहा जाता है,जहाँ बेस का दोहराव टैंडम में होता है।
सैटेलाइट $DNA$ बहुरूपता (polymorphism) प्रदर्शित करते हैं (आबादी में उच्च आवृत्ति पर उत्परिवर्तन की घटना),जो मानव जीनोम की आनुवंशिक मैपिंग और $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग दोनों का आधार है।
जबकि जीन में उत्परिवर्तन अलग-अलग अभिव्यक्तियों वाले एलील उत्पन्न करते हैं,गैर-कोडिंग पुनरावृत्ति $DNA$ में उत्परिवर्तन का कोई तत्काल प्रभाव नहीं पड़ता है। समय के साथ जमा हुए ये उत्परिवर्तन बहुरूपता का आधार बनते हैं।

(C) सैटेलाइट $DNA$ में $DNA$ के अत्यधिक दोहराव वाले अनुक्रम होते हैं जो किसी भी प्रोटीन के लिए कोड नहीं करते हैं।
ये अनुक्रम उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) प्रदर्शित करते हैं,जिसका अर्थ है कि वे व्यक्तियों के बीच काफी भिन्न होते हैं।
चूंकि ये विविधताएं प्रत्येक व्यक्ति के लिए अद्वितीय होती हैं (समान जुड़वां बच्चों को छोड़कर),इसलिए सैटेलाइट $DNA$ का उपयोग $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में किया जाता है।
$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग फोरेंसिक विज्ञान में अपराधियों की पहचान करने,पितृत्व विवादों को सुलझाने और जैविक संबंधों को स्थापित करने के लिए एक महत्वपूर्ण तकनीक है।

(B) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग के चरणों का सही क्रम इस प्रकार है:
$1$. $DNA$ का पृथक्करण $(IV)$।
$2$. रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज द्वारा $DNA$ का पाचन $(II)$।
$3$. इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा $DNA$ खंडों का पृथक्करण $(I)$।
$4$. पृथक $DNA$ खंडों का नाइट्रोसेल्यूलोज या नायलॉन जैसी सिंथेटिक झिल्ली पर स्थानांतरण (ब्लॉटिंग) $(VI)$।
$5$. लेबल किए गए $VNTR$ प्रोब का उपयोग करके संकरण $(III)$।
$6$. ऑटोरेडियोग्राफी द्वारा संकरित $DNA$ खंडों का पता लगाना $(V)$।
अतः,सही क्रम $IV, II, I, VI, III, V$ है।

(B) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग तकनीक $1984$ में सर एलेक जेफ्रीज द्वारा विकसित की गई थी।
यह एक प्रयोगशाला तकनीक है जिसका उपयोग किसी व्यक्ति के $DNA$ लक्षणों का विश्लेषण करके उनकी पहचान निर्धारित करने के लिए किया जाता है।
यह विधि वेरिएबल नंबर टैंडम रिपीट्स $(VNTRs)$ के विश्लेषण पर निर्भर करती है,जो $DNA$ के विशिष्ट अनुक्रम हैं जो व्यक्ति-दर-व्यक्ति भिन्न होते हैं।

(D) विशिष्ट प्रोटीन के $DNA$ अनुक्रमों के साथ बंधन का अध्ययन करने के लिए $X$-रे क्रिस्टलोग्राफी सबसे उपयुक्त तकनीक है।
यह विधि शोधकर्ताओं को $DNA$-प्रोटीन परिसरों सहित जैविक अणुओं की त्रि-आयामी संरचना को परमाणु स्तर पर निर्धारित करने की अनुमति देती है।
क्रिस्टलीकृत नमूने से गुजरने वाली $X$-किरणों के विवर्तन पैटर्न का विश्लेषण करके,वैज्ञानिक प्रोटीन के अमीनो एसिड अवशेषों और $DNA$ के न्यूक्लियोटाइड बेस के बीच सटीक अंतःक्रियाओं का मानचित्रण कर सकते हैं।

(A) $DNA$ फिंगर प्रिंटिंग एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग व्यक्तियों की उनकी अद्वितीय आनुवंशिक संरचना के आधार पर पहचान करने के लिए किया जाता है।
यह मुख्य रूप से $DNA$ पॉलीमॉर्फिज्म पर निर्भर करता है,विशेष रूप से $Restriction$ $Fragment$ $Length$ $Polymorphism$ $(RFLP)$ पर।
रिस्ट्रिक्शन एंजाइम द्वारा उत्पन्न $DNA$ खंडों की लंबाई में ये विभिन्नताएँ जीनोम के विशिष्ट स्थानों पर न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों में अंतर के कारण होती हैं।
चूंकि ये पैटर्न अत्यधिक व्यक्ति-विशिष्ट होते हैं,इसलिए ये $DNA$ प्रोफाइलिंग के लिए मूलभूत आधार के रूप में कार्य करते हैं।

(C) $DNA$ फिंगर प्रिंटिंग एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग व्यक्तियों को उनके संबंधित $DNA$ प्रोफाइल द्वारा पहचानने के लिए किया जाता है।
इसमें न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों में भिन्नता का पता लगाने के लिए $DNA$ नमूनों का आणविक विश्लेषण शामिल है।
ये भिन्नताएं,जिन्हें बहुरूपता (polymorphism) के रूप में जाना जाता है,प्रत्येक व्यक्ति के लिए अद्वितीय होती हैं (समान जुड़वां बच्चों को छोड़कर)।
इसलिए,इसे $VNTR$ विश्लेषण जैसी विशिष्ट तकनीकों का उपयोग करके विभिन्न $DNA$ नमूनों के आणविक विश्लेषण के रूप में परिभाषित किया गया है।

(B) सैटेलाइट $DNA$ पुनरावृत्ति $DNA$ का एक हिस्सा है जो किसी भी प्रोटीन के लिए कोड नहीं करता है।
यह जनसंख्या में उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) दिखाता है।
चूंकि यह बहुरूपता माता-पिता से संतानों में वंशागत होती है,इसलिए यह $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का आधार बनाती है।
इसलिए,यह फोरेंसिक विज्ञान और पितृत्व परीक्षण में अत्यधिक उपयोगी है।

(A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में $DNA$ अनुक्रम के विशिष्ट क्षेत्रों में अंतर की पहचान की जाती है,जिन्हें रिपिटिटिव $DNA$ कहा जाता है। इसमें शामिल चरण इस प्रकार हैं:
$1$. $DNA$ का पृथक्करण।
$2$. रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज द्वारा $DNA$ का पाचन।
$3$. इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा $DNA$ के टुकड़ों का पृथक्करण।
$4$. अलग किए गए $DNA$ के टुकड़ों को नाइट्रोसेल्यूलोज या नायलॉन जैसी सिंथेटिक झिल्लियों पर स्थानांतरित (ब्लॉटिंग) करना।
$5$. लेबल किए गए $VNTR$ प्रोब का उपयोग करके हाइब्रिडाइजेशन।
$6$. ऑटोरेडियोग्राफी द्वारा हाइब्रिडाइज्ड $DNA$ टुकड़ों का पता लगाना।
यदि $DNA$ की मात्रा बहुत कम है,तो $DNA$ नमूने को एम्प्लीफाई करने के लिए अक्सर पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन $(PCR)$ का उपयोग किया जाता है।
जिंक फिंगर एनालिसिस $DNA$-बाइंडिंग प्रोटीन का अध्ययन करने के लिए उपयोग की जाने वाली एक तकनीक है और यह $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग की मानक प्रक्रिया का हिस्सा नहीं है।

(D) $PCR$ (पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन) और $RFLP$ (रिस्ट्रिक्शन फ्रैगमेंट लेंथ पॉलीमॉर्फिज्म) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में उपयोग की जाने वाली मूलभूत तकनीकें हैं।
$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में $DNA$ अनुक्रमों के विशिष्ट क्षेत्रों में अंतर की पहचान की जाती है।
$PCR$ का उपयोग $DNA$ नमूनों की कम मात्रा को प्रवर्धित (amplify) करने के लिए किया जाता है,जबकि $RFLP$ का उपयोग रिस्ट्रिक्शन एंजाइमों द्वारा उत्पन्न $DNA$ टुकड़ों की लंबाई में भिन्नता का विश्लेषण करने के लिए किया जाता है।
ये तकनीकें व्यक्ति को उनकी अद्वितीय आनुवंशिक संरचना के आधार पर पहचानने में सक्षम बनाती हैं।

(A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग एक अत्यधिक संवेदनशील तकनीक है जो जीनोम में मौजूद दोहराव वाले अनुक्रमों पर निर्भर करती है जिन्हें $VNTRs$ (Variable Number Tandem Repeats) के रूप में जाना जाता है।
चूंकि ये अनुक्रम प्रत्येक व्यक्ति के लिए अद्वितीय होते हैं,इसलिए ये एक आणविक हस्ताक्षर के रूप में कार्य करते हैं।
बालों के रोम,लार और सूखे वीर्य जैसे सूक्ष्म जैविक साक्ष्यों में $DNA$ विश्लेषण के लिए पर्याप्त मात्रा में केंद्रक युक्त कोशिकाएं होती हैं।
इसलिए,सूक्ष्म जैविक नमूनों से व्यक्तियों की पहचान करने की क्षमता $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग को फोरेंसिक जांच के लिए,जिसमें पितृत्व परीक्षण और अपराधी की पहचान शामिल है,एक शक्तिशाली उपकरण बनाती है।
कथन और कारण दोनों सही हैं,और कारण यह स्पष्ट करता है कि $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग प्रभावी क्यों है।

(N/A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग एक तकनीक है जिसका उपयोग $DNA$ के स्तर पर विभिन्न व्यक्तियों में भिन्नताओं की पहचान करने और उनका विश्लेषण करने के लिए किया जाता है। यह $DNA$ बहुरूपता (polymorphism) के सिद्धांत पर आधारित है।
अनुप्रयोग:
$1$. फोरेंसिक विज्ञान में संभावित अपराधियों की पहचान करने के लिए इसका उपयोग किया जाता है।
$2$. पितृत्व स्थापित करने और पारिवारिक संबंधों के विवादों को सुलझाने के लिए इसका उपयोग किया जाता है।
$3$. फसलों और पशुधन की व्यावसायिक किस्मों की पहचान करने और उनकी सुरक्षा के लिए इसका उपयोग किया जाता है।
$4$. जीवों के विकासवादी इतिहास का अध्ययन करने और विभिन्न जीवों के समूहों के बीच संबंधों का पता लगाने के लिए इसका उपयोग किया जाता है।

(N/A) $DNA$ में मौजूद न्यूक्लियोटाइड के विशिष्ट अनुक्रमों की पहचान करने की तकनीक,जो प्रत्येक व्यक्ति में अद्वितीय होती है,उसे $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग कहा जाता है।
दो व्यक्तियों या आबादी के बीच आनुवंशिक अंतर को समझने के लिए $DNA$ अनुक्रम को जानना आवश्यक है।
$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग दो व्यक्तियों के अनुक्रमों की तुलना करने की एक त्वरित विधि है।
$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में,$DNA$ अनुक्रम के विशिष्ट क्षेत्रों में पाए जाने वाले अंतरों की पहचान की जाती है,जिन्हें पुनरावृत्त $DNA$ (repetitive $DNA$) कहा जाता है,जहाँ $DNA$ का एक छोटा हिस्सा कई बार दोहराया जाता है।
इस पुनरावृत्त $DNA$ को डेंसिटी ग्रेडिएंट सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा मुख्य जीनोमिक $DNA$ से अलग किया जाता है। मुख्य $DNA$ एक बड़ा शिखर बनाता है,जबकि अन्य छोटे शिखर बनते हैं,जिन्हें सैटेलाइट $DNA$ कहा जाता है।
बेस संरचना ($A:T$ या $G:C$ की प्रचुरता),खंड की लंबाई और पुनरावृत्त इकाइयों की संख्या के आधार पर,इन्हें माइक्रोसेटेलाइट,मिनीसेटेलाइट आदि में वर्गीकृत किया जाता है।
ये अनुक्रम किसी भी प्रोटीन के लिए कोड नहीं करते हैं लेकिन मानव जीनोम का एक बड़ा हिस्सा बनाते हैं। वे उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) प्रदर्शित करते हैं,जो $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का आधार है।
किसी व्यक्ति के किसी भी ऊतक जैसे रक्त,बाल,त्वचा,हड्डियों,लार या शुक्राणु से प्राप्त $DNA$ समान प्रकार की बहुरूपता दिखाते हैं। यह फोरेंसिक अनुप्रयोगों में पहचान के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण के रूप में उपयोगी है। यह बहुरूपता माता-पिता से संतानों में आनुवंशिक रूप से स्थानांतरित होती है; इसलिए,यह पितृत्व विवादों को सुलझाने के लिए एक सटीक विधि है।

(N/A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में $DNA$ अनुक्रम के विशिष्ट क्षेत्रों में अंतर की पहचान करना शामिल है,जिन्हें पुनरावृत्त $DNA$ (repetitive $DNA$) कहा जाता है। इसके चरण निम्नलिखित हैं:
$1$. $DNA$ का पृथक्करण।
$2$. रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज द्वारा $DNA$ का पाचन।
$3$. इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा $DNA$ खंडों का पृथक्करण।
$4$. पृथक किए गए $DNA$ खंडों को नाइट्रोसेल्यूलोज या नायलॉन जैसी सिंथेटिक झिल्ली पर स्थानांतरित (ब्लॉटिंग) करना।
$5$. लेबल किए गए $VNTR$ प्रोब का उपयोग करके संकरण (Hybridization)।
$6$. ऑटोरेडियोग्राफी द्वारा संकरित $DNA$ खंडों का पता लगाना।
$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग को एलेक जेफ्रीस द्वारा विकसित किया गया था। यह प्रोब के रूप में $VNTR$ (वेरिएबल नंबर ऑफ टैंडम रिपीट्स) का उपयोग करता है क्योंकि वे उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) प्रदर्शित करते हैं।

(A) $VNTR$ का अर्थ है वेरिएबल नंबर टैंडम रिपीट्स,जो सैटेलाइट $DNA$ के एक वर्ग,मिनी-सैटेलाइट के अंतर्गत आता है।
$VNTR$ में,एक छोटा $DNA$ अनुक्रम कई कॉपी नंबरों में टैंडम (क्रमबद्ध) रूप से व्यवस्थित होता है।
एक व्यक्ति के गुणसूत्रों में इन पुनरावृत्तियों की संख्या भिन्न होती है,जिसके कारण उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) देखी जाती है।
परिणामस्वरूप,$VNTR$ का आकार $0.1$ से $20$ $kb$ (किलो बेस) तक भिन्न होता है।
$VNTR$ प्रोब के साथ संकरण (hybridization) के बाद,ऑटोरेडियोग्राम में विभिन्न आकारों की पट्टियाँ दिखाई देती हैं।
ये पट्टियाँ किसी व्यक्ति के $DNA$ का एक विशिष्ट पैटर्न प्रदान करती हैं और एक जैसे जुड़वाँ (monozygotic twins) को छोड़कर,जनसंख्या में प्रत्येक व्यक्ति के लिए भिन्न होती हैं।
पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन $(PCR)$ का उपयोग करके इस तकनीक की संवेदनशीलता बढ़ाई जा सकती है।
इसके परिणामस्वरूप,एक कोशिका से प्राप्त $DNA$ भी $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग विश्लेषण करने के लिए पर्याप्त होता है।
फोरेंसिक अनुप्रयोगों के अलावा,इसका उपयोग जनसंख्या और आनुवंशिक विविधता निर्धारित करने के लिए किया जाता है,और $DNA$ फिंगरप्रिंट बनाने के लिए कई अलग-अलग प्रोब का उपयोग किया जाता है।

(N/A) $DNA$ अनुक्रमों में देखी जाने वाली बहुरूपता ($DNA$ polymorphism) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग के साथ-साथ मानव जीनोम के आनुवंशिक मानचित्र तैयार करने में उपयोगी है।
बहुरूपता (आनुवंशिक स्तर पर विविधता) उत्परिवर्तन (mutations) के कारण उत्पन्न होती है। किसी व्यक्ति में नया उत्परिवर्तन उसके कायिक (somatic) कोशिकाओं या जनन (germ) कोशिकाओं में उत्पन्न हो सकता है।
यदि जनन कोशिकाओं में होने वाला उत्परिवर्तन किसी व्यक्ति की संतान उत्पन्न करने की क्षमता को गंभीर रूप से प्रभावित नहीं करता है,तो यह लैंगिक प्रजनन के माध्यम से अगली पीढ़ी में स्थानांतरित हो सकता है।
यदि मानव जनसंख्या में किसी स्थान पर $0.01$ से अधिक आवृत्ति के साथ एक से अधिक एलील (allele) मौजूद हों,तो एलीलिक अनुक्रम की इस विविधता को $DNA$ बहुरूपता कहा जाता है। दूसरे शब्दों में,यदि कोई आनुवंशिक उत्परिवर्तन जनसंख्या में उच्च आवृत्ति के साथ पाया जाता है,तो उसे $DNA$ बहुरूपता कहते हैं।
ये विविधताएं नॉन-कोडिंग $DNA$ अनुक्रमों में अधिक सामान्य होती हैं,क्योंकि इन अनुक्रमों में होने वाले उत्परिवर्तन का व्यक्ति की प्रजनन क्षमता पर तत्काल प्रभाव नहीं पड़ता है।
परिणामस्वरूप,ये उत्परिवर्तन पीढ़ी-दर-पीढ़ी संचित होते रहते हैं,जिससे बहुरूपता उत्पन्न होती है। ये विविधताएं एकल न्यूक्लियोटाइड परिवर्तन से लेकर बड़े पैमाने के परिवर्तनों तक हो सकती हैं।

(N/A)

$VNTR$	$Probe$
$(1)$ यह सैटेलाइट $DNA$ का एक वर्ग है,जिसमें एक छोटा अनुक्रम कई कॉपी नंबरों में टैंडम रूप से व्यवस्थित होता है।	$(1)$ यह रेडियोधर्मी रूप से लेबल किया गया $VNTR$ अनुक्रम है जिसका उपयोग $DNA$ खंडों के साथ संकरण (hybridisation) के लिए किया जाता है।

(N/A) व्यक्तियों में पाए जाने वाले $DNA$ बहुरूपता (polymorphism) का ज्ञान मानव में पाई जाने वाली हजारों अनियमितताओं की पहचान करने,उनका उपचार करने और कुछ हद तक उन्हें रोकने में मदद करता है।
यह फोरेंसिक अनुप्रयोगों में एक पहचान उपकरण के रूप में अत्यधिक उपयोगी है। इसके अलावा,चूंकि बहुरूपता माता-पिता से संतानों में विरासत में मिलती है,इसलिए जब पितृत्व संबंधी विवाद उत्पन्न होते हैं तो $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग एक उत्कृष्ट परीक्षण है।
किसी व्यक्ति के किसी भी ऊतक जैसे रक्त,बाल,हड्डियों,लार या शुक्राणु से प्राप्त $DNA$ समान बहुरूपता प्रदर्शित करता है। इससे अपराधी की सटीक पहचान की जा सकती है।

(N/A) $DNA$ बहुरूपता का अर्थ है किसी जनसंख्या में एक विशिष्ट स्थान (locus) पर आनुवंशिक भिन्नता का होना,जहाँ $0.01$ से अधिक आवृत्ति के साथ एक से अधिक प्रकार के विकल्प (एलील) मौजूद होते हैं।
यह उन उत्परिवर्तनों (mutations) के कारण उत्पन्न होता है जो वंशागत होते हैं।
$DNA$ बहुरूपता का अध्ययन करना महत्वपूर्ण है क्योंकि:
$1$. यह फोरेंसिक विज्ञान में व्यक्तिगत पहचान के लिए एक शक्तिशाली उपकरण के रूप में कार्य करता है।
$2$. चूंकि ये विविधताएं माता-पिता से संतानों में वंशागत होती हैं,इसलिए वे $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का आधार बनाती हैं,जो पितृत्व परीक्षण और कानूनी विवादों को सुलझाने के लिए अत्यंत महत्वपूर्ण है।

(B) बैक्टीरियोफेज ऐसे वायरस हैं जो बैक्टीरिया को संक्रमित करते हैं और इनका जीनोम बहुत छोटा होता है।
ये जीनोम मुख्य रूप से कोडिंग अनुक्रमों से बने होते हैं और इनमें $VNTRs$ (Variable Number Tandem Repeats) के रूप में जाने जाने वाले अत्यधिक दोहराव वाले,नॉन-कोडिंग क्षेत्रों का अभाव होता है।
चूंकि $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग $VNTR$ क्षेत्रों में पाए जाने वाले बहुरूपता (polymorphism) पर निर्भर करती है,इसलिए यह बैक्टीरियोफेज पर लागू नहीं होती है।
अतः,इस उद्देश्य के लिए $VNTR$ जैसे $DNA$ प्रोब का उपयोग करना उचित नहीं होगा।

(B) टैंडम रिपीट्स की संख्या में परिवर्तनशीलता,जिसे $VNTRs$ (Variable Number Tandem Repeats) के रूप में जाना जाता है,$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का आधार है।
ये अनुक्रम उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) प्रदर्शित करते हैं,जिसका अर्थ है कि रिपीट्स की संख्या एक व्यक्ति से दूसरे व्यक्ति में काफी भिन्न होती है।
चूंकि ये पैटर्न प्रत्येक व्यक्ति के लिए अद्वितीय होते हैं (समान जुड़वाँ बच्चों को छोड़कर),इसलिए ये फोरेंसिक विज्ञान और पितृत्व परीक्षण में पहचान के लिए एक विश्वसनीय मार्कर के रूप में कार्य करते हैं।

(A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का उपयोग पितृत्व विवादों को सुलझाने के लिए किया जाता है। $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में $DNA$ अनुक्रम के कुछ विशिष्ट क्षेत्रों में अंतर की पहचान की जाती है जिन्हें पुनरावृत्त $DNA$ (repetitive $DNA$) कहा जाता है,क्योंकि इन अनुक्रमों में $DNA$ का एक छोटा खंड कई बार दोहराया जाता है।
ये पुनरावृत्त $DNA$ घनत्व प्रवणता सेंट्रीफ्यूजेशन (density gradient centrifugation) के दौरान मुख्य जीनोमिक $DNA$ से अलग हो जाते हैं। मुख्य $DNA$ एक बड़ा शिखर (peak) बनाता है और अन्य छोटे शिखरों को सैटेलाइट $DNA$ कहा जाता है। आधार संरचना ($A:T$ समृद्ध या $G:C$ समृद्ध),खंड की लंबाई और पुनरावृत्त इकाइयों की संख्या के आधार पर,सैटेलाइट $DNA$ को माइक्रो-सैटेलाइट,मिनी-सैटेलाइट आदि जैसी कई श्रेणियों में वर्गीकृत किया जाता है। ये अनुक्रम सामान्यतः किसी प्रोटीन के लिए कोड नहीं करते हैं,लेकिन ये मानव जीनोम का एक बड़ा हिस्सा बनाते हैं।
ये अनुक्रम उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) दिखाते हैं और $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का आधार बनते हैं। चूंकि किसी व्यक्ति के किसी भी ऊतक (जैसे रक्त,बाल के रोम,त्वचा,हड्डी,लार,शुक्राणु आदि) से प्राप्त $DNA$ समान स्तर की बहुरूपता दिखाता है,इसलिए यह फोरेंसिक अनुप्रयोगों में एक बहुत ही उपयोगी पहचान उपकरण बन जाता है। इसके अलावा,चूंकि ये बहुरूपता माता-पिता से बच्चों में वंशानुगत होती है,इसलिए $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग पितृत्व परीक्षण का आधार है।
$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग की तकनीक सबसे पहले एलेक जेफ्रीस द्वारा विकसित की गई थी। लालजी सिंह को भारतीय $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का जनक कहा जाता है। उन्होंने एक सैटेलाइट $DNA$ का उपयोग प्रोब के रूप में किया जो बहुत उच्च स्तर की बहुरूपता दिखाता है। इसे वेरिएबल नंबर ऑफ टैंडम रिपीट्स $(VNTR)$ कहा जाता था।
इस तकनीक में रेडियोलेबल वाले $VNTR$ का प्रोब के रूप में उपयोग करके साउदर्न ब्लॉट हाइब्रिडाइजेशन शामिल है। इसमें निम्नलिखित चरण शामिल हैं:
$(i)$ $DNA$ का पृथक्करण,
$(ii)$ रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज द्वारा $DNA$ का पाचन,
$(iii)$ इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा $DNA$ के टुकड़ों का पृथक्करण,
$(iv)$ अलग किए गए $DNA$ टुकड़ों को नाइट्रोसेल्यूलोज या नायलॉन जैसी सिंथेटिक झिल्ली पर स्थानांतरित (ब्लॉटिंग) करना,
$(v)$ लेबल वाले $VNTR$ प्रोब का उपयोग करके हाइब्रिडाइजेशन,और
$(vi)$ ऑटोरेडियोग्राफी द्वारा हाइब्रिडाइज्ड $DNA$ टुकड़ों का पता लगाना।

(N/A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में आनुवंशिक विविधताओं की पहचान करने के लिए विभिन्न $DNA$ मार्कर प्रणालियों का उपयोग किया जाता है। इनमें शामिल हैं:
$1$. रिस्ट्रिक्शन फ्रैगमेंट लेंथ पॉलीमॉर्फिज्म $(RFLPs)$: रिस्ट्रिक्शन एंजाइमों द्वारा उत्पन्न $DNA$ टुकड़ों की लंबाई में भिन्नता पर आधारित है।
$2$. रैंडम एम्प्लीफाइड पॉलीमॉर्फिक $DNAs$ $(RAPDs)$: $DNA$ के यादृच्छिक खंडों को एम्प्लीफाई करने के लिए छोटे प्राइमरों का उपयोग करता है।
$3$. एम्प्लीफाइड फ्रैगमेंट लेंथ पॉलीमॉर्फिज्म $(AFLPs)$: रिस्ट्रिक्शन डाइजेशन और $PCR$ एम्प्लीफिकेशन का संयोजन है।
$4$. सिंपल सीक्वेंस रिपीट्स $(SSRs)$: जिन्हें माइक्रोसेटेलाइट्स के रूप में भी जाना जाता है,ये छोटे $DNA$ अनुक्रमों के टैंडम रिपीट्स होते हैं।
$5$. सिंगल न्यूक्लियोटाइड पॉलीमॉर्फिज्म $(SNPs)$: व्यक्तियों के बीच $DNA$ अनुक्रम में एक ही स्थान पर होने वाली भिन्नताएँ।

(N/A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग दो व्यक्तियों के $DNA$ अनुक्रमों में अंतर का विश्लेषण करने का एक बहुत तेज़ तरीका है।
इसमें पुनरावृत्त $DNA$ (repetitive $DNA$) में अंतर की पहचान शामिल है।
पुनरावृत्त $DNA$ $DNA$ का एक विशिष्ट क्षेत्र है जिसमें $DNA$ का एक छोटा खंड कई बार दोहराया जाता है।
घनत्व प्रवणता सेंट्रीफ्यूजेशन (density gradient centrifugation) के माध्यम से,इन पुनरावृत्त $DNA$ को मुख्य जीनोमिक $DNA$ से अलग किया जाता है।
सेंट्रीफ्यूजेशन के दौरान मुख्य $DNA$ एक बड़ा शिखर (peak) बनाता है और अन्य छोटे शिखरों को सैटेलाइट $DNA$ के रूप में जाना जाता है।
ये अनुक्रम सामान्यतः किसी भी प्रोटीन के लिए कोड नहीं करते हैं,लेकिन ये मानव जीनोम का एक बड़ा हिस्सा बनाते हैं।
सैटेलाइट $DNA$ को खंड की लंबाई,पुनरावृत्त इकाइयों की संख्या और आधार संरचना ($A:T$-समृद्ध या $G:C$-समृद्ध) के आधार पर माइक्रोसेटेलाइट,मिनीसेटेलाइट आदि जैसी कई श्रेणियों में वर्गीकृत किया गया है।
सैटेलाइट $DNA$ उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) दिखाता है और यही $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का आधार बनता है।
बहुरूपता: यह आनुवंशिक स्तर पर व्यक्तियों में होने वाली भिन्नता है। बहुरूपता उत्परिवर्तन (mutations) के कारण उत्पन्न होती है।
यह विकास और प्रजातीकरण में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है।
एक आबादी में,यदि कोई वंशानुगत उत्परिवर्तन उच्च आवृत्ति पर देखा जाता है,तो इसे $DNA$ बहुरूपता कहा जाता है।
एक व्यक्ति में,प्रत्येक ऊतक (जैसे,रक्त,बाल कूप,त्वचा,हड्डी,लार आदि) से प्राप्त $DNA$ समान स्तर की बहुरूपता दिखाता है।
इस प्रकार,वे फोरेंसिक अनुप्रयोगों में एक आवश्यक पहचान उपकरण बन जाते हैं।
चूंकि बहुरूपता माता-पिता से बच्चों में विरासत में मिलती है,इसलिए यह पितृत्व परीक्षण में उपयोगी है।
$DNA$ फिंगरप्रिंटिंग की तकनीक: एलेक जेफ्रीस ने शुरू में वंशानुगत रोगों के लिए मार्कर खोजने के लिए $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग विकसित की,जिसे $DNA$ टाइपिंग या $DNA$ प्रोफाइलिंग भी कहा जाता है।
उन्होंने एक सैटेलाइट $DNA$ का उपयोग प्रोब के रूप में किया जो बहुत उच्च स्तर की बहुरूपता दिखाता है,जिसे वेरिएबल नंबर ऑफ टैंडम रिपीट्स $(VNTRs)$ कहा जाता है।
इस तकनीक में रेडियोलेबल वाले $VNTR$ का उपयोग करके सदर्न ब्लॉट हाइब्रिडाइजेशन शामिल है।
तकनीक के चरण इस प्रकार हैं:
$(i)$ $DNA$ अलगाव: कोशिकाओं से $DNA$ निकाला जाता है।
$(ii)$ प्रवर्धन (Amplification): पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन $(PCR)$ का उपयोग करके निकाले गए $DNA$ की कई प्रतियां बनाई जा सकती हैं।
$(iii)$ पाचन: रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लिएज द्वारा $DNA$ का पाचन।
$(iv)$ पृथक्करण: जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा $DNA$ के टुकड़ों का पृथक्करण।
$(v)$ सदर्न ब्लॉटिंग: अलग किए गए $DNA$ टुकड़ों को सिंथेटिक झिल्ली (जैसे नायलॉन या नाइट्रोसेल्यूलोज) पर स्थानांतरित करना।

(N/A) $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग किसी भी दो व्यक्तियों के $DNA$ अनुक्रमों की तुलना करने की एक त्वरित विधि है।
इसमें $DNA$ अनुक्रम के विशिष्ट क्षेत्रों में अंतर की पहचान की जाती है जिन्हें पुनरावृत्त $DNA$ (repetitive $DNA$) कहा जाता है,जहाँ $DNA$ का एक छोटा खंड कई बार दोहराया जाता है।
ये पुनरावृत्त अनुक्रम घनत्व प्रवणता सेंट्रीफ्यूजेशन के दौरान मुख्य जीनोमिक $DNA$ से अलग शिखरों (peaks) के रूप में अलग हो जाते हैं। मुख्य $DNA$ एक बड़ा शिखर बनाता है,जबकि छोटे शिखरों को सैटेलाइट $DNA$ कहा जाता है।
ये अनुक्रम आमतौर पर प्रोटीन के लिए कोडिंग नहीं करते हैं लेकिन मानव जीनोम का एक बड़ा हिस्सा बनाते हैं। वे उच्च स्तर की बहुरूपता (polymorphism) प्रदर्शित करते हैं,जो $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग का आधार है।
बहुरूपता (आनुवंशिक भिन्नता) उत्परिवर्तन (mutations) के कारण उत्पन्न होती है। यदि जनन कोशिका का उत्परिवर्तन वंशानुगत है और प्रजनन क्षमता को बाधित नहीं करता है,तो यह आबादी में फैल सकता है।
$DNA$ बहुरूपता को मानव आबादी में किसी लोकस (locus) पर $0.01$ से अधिक आवृत्ति के साथ एक से अधिक प्रकार (एलील) की उपस्थिति के रूप में परिभाषित किया गया है।
तकनीक: एलेक जेफ्रीस द्वारा विकसित,यह प्रोब के रूप में सैटेलाइट $DNA$ का उपयोग करती है,विशेष रूप से वेरिएबल नंबर ऑफ टैंडम रिपीट्स $(VNTR)$।
इस प्रक्रिया में निम्नलिखित चरण शामिल हैं:
$(i)$ $DNA$ का पृथक्करण।
$(ii)$ रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लीज द्वारा $DNA$ का पाचन।
$(iii)$ इलेक्ट्रोफोरेसिस द्वारा $DNA$ खंडों का पृथक्करण।
$(iv)$ अलग किए गए $DNA$ खंडों को सिंथेटिक झिल्ली (नाइट्रोसेल्यूलोज या नायलॉन) पर स्थानांतरित (ब्लॉटिंग) करना।
$(v)$ लेबल किए गए $VNTR$ प्रोब का उपयोग करके हाइब्रिडाइजेशन।
$(vi)$ ऑटोरेडियोोग्राफी द्वारा हाइब्रिडाइज्ड $DNA$ खंडों का पता लगाना।

(N/A) $DNA$ बहुरूपता आनुवंशिक स्तर पर होने वाली विविधता को संदर्भित करती है जहाँ एक विशिष्ट लोकस पर कई एलील मौजूद होते हैं।
ये विविधताएँ माता-पिता से संतानों में वंशागत होती हैं,जो इन्हें आनुवंशिक विश्लेषण के लिए स्थिर मार्कर बनाती हैं।
नॉन-कोडिंग अनुक्रमों में उत्परिवर्तन (mutations) समय के साथ जमा हो जाते हैं,जिससे बहुरूपता के अद्वितीय पैटर्न बनते हैं।
चूँकि ये विविधताएँ वंशागत होती हैं और व्यक्तियों के बीच उच्च स्तर की भिन्नता दर्शाती हैं,इसलिए ये गुणसूत्रों पर जीनों को मैप करने के लिए मील के पत्थर के रूप में कार्य करती हैं।
परिणामस्वरूप,$DNA$ बहुरूपता मानव जीनोम के आनुवंशिक मानचित्रण और $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग जैसी तकनीकों का मूलभूत आधार है।

(N/A) $(1)$ प्रोब एक लेबल किया हुआ एकल-रज्जुक (single-stranded) $DNA$ या $RNA$ खंड है,जो स्क्रीनिंग प्रक्रिया के दौरान रुचि के पूरक $DNA$ या $RNA$ अनुक्रम के साथ संकरण (hybridize) कर सकता है।
$(2)$ मानव जीनोम में कई छोटे $DNA$ अनुक्रम होते हैं,जो विभिन्न गुणसूत्रीय स्थानों पर अलग-अलग लंबाई के टैंडम रिपीट्स (tandem repeats) के रूप में मौजूद होते हैं। ये वेरिएबल नंबर टैंडम रिपीट्स $(VNTRs)$ अत्यधिक बहुरूपी (polymorphic) होते हैं और $DNA$ फिंगरप्रिंटिंग में आवश्यक घटकों के रूप में कार्य करते हैं।

(C) फ्रेडरिक सेंगर ने $DNA$ अनुक्रमण (sequencing) के लिए चेन टर्मिनेशन विधि विकसित की थी,जिसे डिडिऑक्सी विधि के रूप में भी जाना जाता है।
स्वचालित $DNA$ सीक्वेंसर सेंगर की डिडिऑक्सी अनुक्रमण विधि के सिद्धांत पर कार्य करते हैं।
ये मशीनें $DNA$ स्ट्रैंड में न्यूक्लियोटाइड्स के क्रम को निर्धारित करने के लिए फ्लोरोसेंट रूप से लेबल किए गए डिडिऑक्सीन्यूक्लियोटाइड्स का उपयोग करती हैं।