Tissue Culture Questions in Hindi

(N/A) यह वैज्ञानिक रूप से संभव है। ऊतक संवर्धन (Tissue culture) की मदद से, बहुत कम समय में कई पौधों का प्रवर्धन प्राप्त करना संभव है। ऊतक संवर्धन के माध्यम से हजारों पौधे पैदा करने की इस विधि को सूक्ष्मप्रवर्धन (Micropropagation) कहा जाता है। इनमें से प्रत्येक पौधा आनुवंशिक रूप से उस मूल पौधे के समान होता है जिससे उन्हें उगाया गया था। इन्हें सोमाक्लोन्स (Somaclones) भी कहा जाता है।

(N/A) ऊतक संवर्धन द्वारा उगाए गए पौधे जनक पौधे के क्लोन होते हैं,जिसका अर्थ है कि वे आनुवंशिक रूप से मूल पौधे के समान होते हैं।
इन पौधों की उपयोगिता निम्नलिखित है:
$1$. वांछनीय लक्षणों को बनाए रखना: चूंकि वे क्लोन होते हैं,इसलिए वे जनक पौधे के सभी लाभकारी गुणों को बनाए रखते हैं।
$2$. तीव्र गुणन: ऊतक संवर्धन बहुत कम समय में बड़ी संख्या में पौधों के उत्पादन की अनुमति देता है।
$3$. रोगमुक्त पौधे: विभज्योतक (meristem) संवर्धन का उपयोग करके संक्रमित जनकों से वायरस-मुक्त पौधे तैयार करना संभव है।
$4$. संरक्षण: यह दुर्लभ या लुप्तप्राय पादप प्रजातियों के संरक्षण में मदद करता है।

(N/A) प्रोटोप्लास्ट संलयन प्रयोगों के दौरान पादप कोशिका में सबसे महत्वपूर्ण भौतिक अवरोध उसकी कठोर कोशिका भित्ति (cell wall) है।
इस अवरोध को दूर करने के लिए,पादप ऊतक को विशिष्ट कोशिका भित्ति-अपघटक एंजाइमों,मुख्य रूप से सेल्युलेज और पेक्टिनेज के साथ उपचारित किया जाता है।
ये एंजाइम क्रमशः कोशिका भित्ति के सेलुलोज और पेक्टिन घटकों को पचा लेते हैं,जिससे नग्न प्रोटोप्लास्ट मुक्त हो जाता है,जो केवल प्लाज्मा झिल्ली से घिरा होता है।

(N/A) ऊतक संवर्धन विधियों के लाभ निम्नलिखित हैं:
$(i)$ इन विधियों के अनुप्रयोग से बहुत कम समय में बड़ी संख्या में पौधों का प्रवर्धन प्राप्त करना संभव है।
$(ii)$ ऊतक संवर्धन के माध्यम से हजारों पौधों के उत्पादन की इस विधि को सूक्ष्म प्रवर्धन (Micro-propagation) कहा जाता है।
$(iii)$ इनमें से प्रत्येक पौधा आनुवंशिक रूप से उस मूल पौधे के समान होगा जिससे उन्हें उगाया गया था,अर्थात,वे सोमाक्लोन (Somaclones) हैं।
$(iv)$ टमाटर,केला,सेब आदि जैसे कई महत्वपूर्ण खाद्य पौधों का उत्पादन इस विधि का उपयोग करके व्यावसायिक स्तर पर किया गया है।
$(v)$ इस विधि का एक और महत्वपूर्ण अनुप्रयोग रोगग्रस्त पौधों से स्वस्थ पौधों को प्राप्त करना है। यद्यपि पौधा वायरस से संक्रमित होता है,फिर भी विभज्योतक (शीर्षस्थ और कक्षीय) वायरस से मुक्त होता है। इसलिए,वायरस-मुक्त पौधे प्राप्त करने के लिए विभज्योतक को हटाकर उसे इन-विट्रो (in-vitro) में उगाया जा सकता है। वैज्ञानिक केले,गन्ने,आलू आदि के विभज्योतक का संवर्धन करने में सफल रहे हैं।

(N/A) किसी भी कोशिका/एक्सप्लांट से एक संपूर्ण पादप उत्पन्न करने की क्षमता को पूर्णशक्तता (totipotency) कहा जाता है।
इन विधियों के अनुप्रयोग से बहुत कम समय में कई पौधों का प्रवर्धन प्राप्त करना संभव है।
ऊतक संवर्धन (tissue culture) के माध्यम से हजारों पौधों के उत्पादन की इस विधि को सूक्ष्मप्रवर्धन (micropropagation) कहा जाता है।
इनमें से प्रत्येक पौधा आनुवंशिक रूप से उस मूल पौधे के समान होगा जिससे उन्हें उगाया गया था,अर्थात,वे सोमाक्लोन (somaclones) होते हैं।
टमाटर,केला,सेब आदि जैसे कई महत्वपूर्ण खाद्य पौधों का उत्पादन इस विधि का उपयोग करके व्यावसायिक स्तर पर किया गया है।
इस विधि का एक अन्य महत्वपूर्ण अनुप्रयोग रोगग्रस्त पौधों से स्वस्थ पौधों को प्राप्त करना है।
यद्यपि पौधा वायरस से संक्रमित होता है,फिर भी विभज्योतक (meristem) (शीर्षस्थ और कक्षीय) वायरस से मुक्त होता है।
इसलिए,वायरस-मुक्त पौधे प्राप्त करने के लिए विभज्योतक को हटाकर उसे इन विट्रो (in vitro) में उगाया जा सकता है।
वैज्ञानिक केले,गन्ने,आलू आदि के विभज्योतक को संवर्धित करने में सफल रहे हैं।

(N/A) $Somatic$ $hybridisation$ (कायिक संकरण): पौधों की दो अलग-अलग किस्मों से अलग किए गए प्रोटोप्लास्ट,जिनमें से प्रत्येक में एक वांछनीय गुण होता है,को संलयित करके संकर प्रोटोप्लास्ट प्राप्त किए जा सकते हैं। इन्हें आगे विकसित करके एक नया पौधा बनाया जा सकता है। इन संकरों को $somatic$ $hybrids$ (कायिक संकर) कहा जाता है और इस प्रक्रिया को $somatic$ $hybridisation$ (कायिक संकरण) कहा जाता है।
$Totipotency$ (पूर्णशक्तता): किसी भी कोशिका या एक्सप्लांट को बाँझ परिस्थितियों में विशेष पोषक माध्यम में टेस्ट ट्यूब में उगाकर उससे पूरा पौधा उत्पन्न करने की क्षमता को $totipotency$ (पूर्णशक्तता) कहा जाता है।

(A) पादप ऊतक संवर्धन में,सुक्रोज का उपयोग कार्बन के स्रोत के रूप में सबसे सामान्यतः किया जाता है। सुक्रोज एक डाईसैकेराइड है जो ग्लूकोज और फ्रुक्टोज से बना होता है। इसे प्राथमिकता दी जाती है क्योंकि यह अपेक्षाकृत सस्ता है,आसानी से स्टरलाइज़ किया जा सकता है,और संवर्धन माध्यम में पादप कोशिकाओं द्वारा इसका आसानी से चयापचय किया जा सकता है।

(B) यदि कोई पौधा वायरस से संक्रमित है,तब भी उसका विभज्योतक (शीर्षस्थ और कक्षीय विभज्योतक) वायरस से मुक्त होता है। इसलिए,विभज्योतक को हटाकर और उसे पात्रे (in vitro) में उगाकर वायरस-मुक्त पौधे प्राप्त किए जा सकते हैं। इस तकनीक को $Meristem$ $Culture$ (विभज्योतक संवर्धन) के रूप में जाना जाता है,जो $Tissue$ $Culture$ (ऊतक संवर्धन) का एक प्रकार है।

(B) पादप कोशिका की संपूर्ण पौधे में विकसित होने की क्षमता को $Totipotency$ (पूर्णशक्तता) कहा जाता है। यह पादप ऊतक संवर्धन का मूल सिद्धांत है,जिसमें किसी भी जीवित पादप कोशिका (एक्सप्लांट) को उपयुक्त प्रयोगशाला स्थितियों में संवर्धित करके एक पूर्ण,आनुवंशिक रूप से समान पौधा उत्पन्न किया जा सकता है।

(C) पोमेटो कायिक संकरण (somatic hybridization) की तकनीक द्वारा उत्पादित एक कायिक संकरित पौधा है।
यह दो अलग-अलग पौधों की प्रजातियों के प्रोटोप्लास्ट के संलयन द्वारा बनाया जाता है: टमाटर $(Solanum \text{ } lycopersicum)$ और आलू $(Solanum \text{ } tuberosum)$।
हालाँकि इसे दोनों पौधों के गुणों को संयोजित करने के लिए विकसित किया गया था, लेकिन यह व्यावसायिक रूप से सफल नहीं हुआ क्योंकि यह एक साथ उच्च गुणवत्ता वाले टमाटर और आलू दोनों का उत्पादन नहीं कर सका।

(A) सोमाक्लोन्स ऊतक संवर्धन तकनीकों के माध्यम से उत्पादित आनुवंशिक रूप से समान पौधे होते हैं।
सूक्ष्म प्रवर्धन (Micropropagation) ऊतक संवर्धन की एक ऐसी विधि है जो एक ही एक्सप्लांट से बड़ी संख्या में आनुवंशिक रूप से समान पादप उत्पन्न करने की अनुमति देती है।
चूंकि ये पादप अलैंगिक प्रजनन (समसूत्री विभाजन) के माध्यम से एक ही जनक ऊतक से प्राप्त होते हैं,इसलिए इन्हें सोमाक्लोन्स कहा जाता है।

(B) एक पादप कोशिका कोशिका भित्ति और प्रोटोप्लास्ट (कोशिका का जीवित भाग) से बनी होती है।
जब एंजाइमेटिक पाचन (सेल्युलेज और पेक्टिनेज जैसे एंजाइमों का उपयोग करके) द्वारा कोशिका भित्ति को हटा दिया जाता है,तो कोशिका के शेष जीवित भाग को,जो प्लाज्मा झिल्ली से घिरा होता है,$Protoplast$ (प्रोटोप्लास्ट) के रूप में जाना जाता है।
$Protoplasts$ का उपयोग पादप ऊतक संवर्धन और कायिक संकरण प्रयोगों में व्यापक रूप से किया जाता है।

(D) पादप ऊतक संवर्धन में,पोषक माध्यम एक्सप्लांट की वृद्धि और विकास के लिए आवश्यक पोषक तत्व प्रदान करता है।
सुक्रोज का उपयोग इन माध्यमों में कार्बन के स्रोत के रूप में सबसे अधिक किया जाता है क्योंकि यह पादप कोशिकाओं द्वारा आसानी से चयापचय (metabolized) हो जाता है,अपेक्षाकृत सस्ता है,और ऑटोक्लेविंग प्रक्रिया के दौरान स्थिर रहता है।
ग्लूकोज या फ्रुक्टोज जैसी अन्य शर्करा का भी कभी-कभी उपयोग किया जाता है,लेकिन सुक्रोज को उसकी दक्षता और लागत-प्रभावशीलता के कारण प्राथमिकता दी जाती है।

(C) सूक्ष्म-प्रवर्धन पादप प्रवर्धन की एक विधि है जिसमें ऊतक संवर्धन (Tissue culture) तकनीकों का उपयोग करके कम समय में बड़ी संख्या में पौधों का उत्पादन किया जाता है।
इस प्रक्रिया में,उत्पन्न पौधे आनुवंशिक रूप से मूल पौधे के समान होते हैं,इसलिए उन्हें सोमाक्लोन (Somaclones) कहा जाता है।
अतः,सूक्ष्म-प्रवर्धन अनिवार्य रूप से ऊतक संवर्धन का ही एक रूप है।

(C) कायिक संकर (somatic hybrid) वह पौधा है जो दो अलग-अलग पादप प्रजातियों के प्रोटोप्लास्ट के संलयन से उत्पन्न होता है।
पोमेटो कायिक संकर का एक उत्कृष्ट उदाहरण है,जिसे आलू $(Solanum \, tuberosum)$ और टमाटर $(Solanum \, lycopersicum)$ के प्रोटोप्लास्ट के संलयन द्वारा बनाया गया था।
$Atlas \, 66$ प्रोटीन से भरपूर गेहूं की एक किस्म है।
$A. \, esculentus$ (भिंडी) एक सब्जी की फसल है।
हिमगिरी गेहूं की एक किस्म है जो हिल बंट और लीफ रस्ट के प्रति प्रतिरोधी है।

(A) पादप प्रोटोप्लास्ट प्राप्त करने के लिए,पादप कोशिका भित्ति का पाचन करना आवश्यक है। पादप कोशिका भित्ति मुख्य रूप से सेलुलोज,हेमीसेलुलोज और पेक्टिन से बनी होती है। सेल्युलेज वह एंजाइम है जो सेलुलोज को तोड़ता है,जो पादप कोशिका भित्ति का मुख्य संरचनात्मक घटक है। इसलिए,कोशिका भित्ति को पचाने और प्रोटोप्लास्ट को मुक्त करने के लिए सेल्युलेज (अक्सर पेक्टिनेज के साथ) का उपयोग किया जाता है।

(D) पादप ऊतक संवर्धन में,$callus$ (कैलस) को पादप कोशिकाओं के एक असंगठित और अविभेदित समूह के रूप में परिभाषित किया जाता है। यह आमतौर पर तब बनता है जब पादप के हिस्सों (जैसे पत्ती,तने या जड़ के टुकड़े) को विशिष्ट पादप वृद्धि नियामकों (ऑक्सिन और साइटोकाइनिन) युक्त पोषक माध्यम पर संवर्धित किया जाता है। ये कोशिकाएं आगे चलकर विभिन्न पादप अंगों या पूर्ण पादप में विभेदित होने की क्षमता रखती हैं।

(B) कथन $I$ गलत है क्योंकि कोलोस्ट्रम एंटीबॉडी (विशेष रूप से $IgA$) से भरपूर होता है,एंटीजन से नहीं।
कथन $II$ गलत है क्योंकि चिकनगुनिया चिकनगुनिया वायरस के कारण होता है,जो एक $RNA$ वायरस है,बैक्टीरिया नहीं।
कथन $III$ सही है क्योंकि विभज्योतक ऊतक (meristematic tissues) वायरल संक्रमण से मुक्त होते हैं,जिससे ऊतक संवर्धन के माध्यम से वायरस-मुक्त पौधे प्राप्त किए जा सकते हैं।
कथन $IV$ गलत है क्योंकि बीयर का उत्पादन आसवन के बिना जौ जैसे अनाज के किण्वन द्वारा किया जाता है। आसवन का उपयोग व्हिस्की या ब्रांडी जैसे पेय पदार्थों के लिए किया जाता है।
अतः,केवल एक कथन $(III)$ सही है।

(A) वायरस मुक्त पौधे विभज्योतक (मेरिस्टेम) संवर्धन के माध्यम से प्राप्त किए जा सकते हैं।
इसका कारण यह है कि विभज्योतक ऊतक निरंतर कोशिका विभाजन और वृद्धि वाला क्षेत्र होता है।
कई पौधों में,वायरस विभज्योतक में होने वाले तीव्र कोशिका विभाजन की गति के साथ तालमेल नहीं बिठा पाते हैं,जिससे यह क्षेत्र वायरल संक्रमण से मुक्त रहता है।
इसलिए,शीर्षस्थ या कक्षीय विभज्योतक का संवर्धन करके,स्वस्थ और वायरस मुक्त पौधों को पुनर्जीवित किया जा सकता है।

(A) वायरस मुक्त पौधे $Meristem$ (विभज्योतक) संवर्धन के माध्यम से प्राप्त किए जा सकते हैं।
भले ही कोई पौधा वायरस से संक्रमित हो, $Meristem$ (अग्रस्थ और कक्षीय) वायरस से मुक्त रहता है क्योंकि वायरस इन तेजी से विभाजित होने वाली कोशिकाओं में प्रतिकृति नहीं बना सकते हैं।
$Meristem$ को अलग करके और उसका $in vitro$ संवर्धन करके, हम जनक पौधे के स्वस्थ और वायरस मुक्त क्लोन उत्पन्न कर सकते हैं।

(D) टिश्यू कल्चर पादप कोशिकाओं,ऊतकों या अंगों को नियंत्रित प्रयोगशाला स्थितियों में एक बाँझ,कृत्रिम पोषक माध्यम में उगाने की एक तकनीक है।
एक्सप्लांट की वृद्धि और विकास का समर्थन करने के लिए,कल्चर माध्यम में आवश्यक पोषक तत्व होने चाहिए।
इन आवश्यकताओं में शामिल हैं:
$1$. अकार्बनिक लवण (मैक्रो और सूक्ष्म पोषक तत्व)।
$2$. कार्बन स्रोत (जैसे,सुक्रोज)।
$3$. विटामिन और अमीनो एसिड।
$4$. वृद्धि नियामक (फाइटोहोर्मोन) जैसे ऑक्सिन और साइटोकाइनिन।
$5$. अगर-अगर जैसे जमने वाले एजेंट (यदि ठोस माध्यम की आवश्यकता हो)।
चूंकि सूचीबद्ध सभी विकल्प कल्चर माध्यम के आवश्यक घटक हैं,इसलिए सही उत्तर $D$ है।

(B) अगुणित पौधों को ऊतक संवर्धन तकनीकों के माध्यम से परागकणों (लघु बीजाणु) को संवर्धित करके प्राप्त किया जा सकता है।
चूंकि परागकण अगुणित ($n$ गुणसूत्र संख्या) होते हैं,इसलिए वे अगुणित पौधों में विकसित होते हैं,जो पादप प्रजनन कार्यक्रमों में समयुग्मजी (homozygous) वंशक्रम बनाने के लिए उपयोगी होते हैं।

(D) शीर्षस्थ विभज्योतक (Apical meristem) पौधे के प्राथमिक और द्वितीयक प्ररोह और जड़ों के शीर्ष पर मौजूद होते हैं।
शीर्षस्थ विभज्योतक की कोशिकाएं विभाजन की बहुत सक्रिय अवस्था में होती हैं,जिनमें सघन कोशिका द्रव्य और पतली कोशिका भित्ति होती है।
कोशिका विभाजन की तीव्र दर के कारण,वायरस इन ऊतकों के भीतर प्रतिकृति (replicate) बनाने और फैलने में असमर्थ होते हैं,जिससे शीर्षस्थ विभज्योतक आमतौर पर वायरस मुक्त रहते हैं।

(B) कैलस में जड़ का आरम्भन (root initiation) ऑक्सिन का कार्य है। साइटोकाइनिन पत्तियों और अन्य अंगों के जीर्णता (senescence) में देरी करते हैं और प्ररोह (shoot) निर्माण को प्रेरित करते हैं।

(A) क्रायोप्रिजर्वेशन एक तकनीक है जिसका उपयोग पादप कोशिकाओं,ऊतकों या अंगों को बहुत कम तापमान पर संरक्षित करने के लिए किया जाता है। इस प्रक्रिया में,पादप सामग्री को तरल नाइट्रोजन में $-196^{\circ} C$ पर संग्रहित किया जाता है। यह अत्यंत कम तापमान सभी चयापचय गतिविधियों को रोक देता है और जैविक क्षय को रोकता है,जिससे सामग्री लंबे समय तक जीवित रह सकती है।

(D) सूक्ष्मप्रवर्धन ऊतक संवर्धन की एक तकनीक है जिसका उपयोग पौधों के तीव्र गुणन के लिए किया जाता है।
इसमें पादप वृद्धि नियामकों,विशेष रूप से ऑक्सिन्स और साइटोकाइनिन का उपयोग किया जाता है।
संवर्धन माध्यम में ऑक्सिन्स और साइटोकाइनिन का अनुपात महत्वपूर्ण होता है क्योंकि यह एक्सप्लांट में मॉर्फोजेनेसिस (जैसे जड़ या प्ररोह का विकास) को निर्धारित करता है।

(C) पादप कोशिका भित्ति मुख्य रूप से सेलुलोज,हेमीसेलुलोज और पेक्टिन से बनी होती है।
प्रोटोप्लास्ट (कोशिका भित्ति रहित पादप कोशिका) को अलग करने के लिए,कोशिका भित्ति का एंजाइमी पाचन करना आवश्यक है।
कोशिका भित्ति के सेलुलोज घटक को पचाने के लिए सेल्युलेज का उपयोग किया जाता है,जबकि पेक्टिन घटक को तोड़ने के लिए पेक्टिनेज का उपयोग किया जाता है।
इसलिए,प्रोटोप्लास्ट के प्रभावी अलगाव के लिए पेक्टिनेज और सेल्युलेज दोनों के संयोजन की आवश्यकता होती है।

(B) एक पादप कोशिका की विभाजित होकर और विभेदित होकर एक जीव की सभी विशिष्ट कोशिकाओं में परिवर्तित होने तथा एक पूर्ण पौधे को पुनर्जीवित करने की आनुवंशिक क्षमता को 'टोटीपोटेंसी' (पूर्णशक्तता) कहा जाता है। यह गुण पादप ऊतक संवर्धन का आधारभूत सिद्धांत है।

(C) ऊतक संवर्धन के माध्यम से हजारों पौधों को उगाने या उत्पन्न करने की विधि को $Micropropagation$ (सूक्ष्म प्रवर्धन) कहा जाता है। इस प्रक्रिया में,ऊतक संवर्धन तकनीकों का उपयोग करके कम समय में बड़ी संख्या में पौधे उत्पन्न किए जाते हैं। इनमें से प्रत्येक पौधा आनुवंशिक रूप से उस मूल पौधे के समान होता है जिससे उन्हें उगाया गया था,और उन्हें $Somaclones$ कहा जाता है।

(D) $G$ Haberlandt ने $1902$ में कोशिकीय पूर्णशक्तता (cellular totipotency) की अवधारणा प्रस्तावित की थी। उन्होंने सुझाव दिया कि प्रत्येक पादप कोशिका में इन विट्रो परिस्थितियों में कृत्रिम पोषक माध्यम में संवर्धित किए जाने पर एक पूर्ण पौधे के रूप में विकसित होने की अंतर्निहित क्षमता होती है। इस मौलिक विचार ने आधुनिक पादप ऊतक संवर्धन (plant tissue culture) का आधार रखा।

(C) इस विधि द्वारा रोगग्रस्त पौधों से स्वस्थ पौधे प्राप्त किए जा सकते हैं।
विषाणु-संक्रमित पौधे का शीर्षस्थ और कक्षीय विभज्योतक (मेरिस्टेम) ही एकमात्र ऐसा भाग है जो विषाणु-मुक्त होता है।
विभज्योतक को हटाकर और इसे इन-विट्रो (प्रयोगशाला में) विकसित करके,विषाणु-मुक्त पौधे प्राप्त किए जा सकते हैं।

(A) ऊतक संवर्धन में,प्ररोह (shoot) के पुनर्जनन को साइटोकाइनिन द्वारा बढ़ावा दिया जाता है,जबकि जड़ के पुनर्जनन को $NAA$ (नेफ़थलीन एसिटिक एसिड) जैसे ऑक्सिन द्वारा बढ़ावा दिया जाता है।
साइटोकाइनिन की तुलना में ऑक्सिन की अधिकता जड़ के पुनर्जनन को बढ़ावा देती है।
इसके विपरीत,ऑक्सिन की तुलना में साइटोकाइनिन की उच्च सांद्रता प्ररोह के पुनर्जनन को बढ़ावा देती है।
इसलिए,जड़ों को प्रेरित करने के लिए ऑक्सिन की उच्च सांद्रता और साइटोकाइनिन की कम सांद्रता की आवश्यकता होती है।

(B) परागकण एक नर युग्मकोद्भिद है जिसमें नर युग्मक होते हैं। यह अर्धसूत्रीविभाजन के माध्यम से बनता है और इसलिए यह अगुणित $(n)$ होता है।
टिश्यू कल्चर (ऊतक संवर्धन) में,जब एक अंकुरित परागकण का संवर्धन किया जाता है,तो यह समसूत्री विभाजन के माध्यम से भ्रूण और बाद में एक पौधे में विकसित होता है।
चूंकि शुरुआती सामग्री (परागकण) अगुणित है,इसलिए परिणामी पौधा भी अगुणित $(n)$ होगा।

(C) पादप ऊतक संवर्धन (tissue culture) में,जनक पादप से लिए गए और वृद्धि या पुनर्जनन के लिए पोषक माध्यम में रखे गए पादप के किसी भी भाग को एक्सप्लांट कहा जाता है। इसमें पत्तियों,तनों,जड़ों या विभज्योतक ऊतक के टुकड़े शामिल हो सकते हैं।

(B) हार्डनिंग,टिश्यू कल्चर द्वारा उत्पादित पौधों को खेत में उगाने से पहले बाहरी वातावरण के प्रति धीरे-धीरे अनुकूलित करने की प्रक्रिया है।
इन पौधों को शुरुआत में नियंत्रित,उच्च आर्द्रता और कम रोशनी वाले वातावरण में उगाया जाता है।
खेत में स्थानांतरित करने से पहले,उन्हें प्राकृतिक परिस्थितियों में धीरे-धीरे उजागर किया जाता है ताकि वे नए वातावरण में जीवित रह सकें और अनुकूलन कर सकें।

(A) प्रोटोप्लास्ट संलयन में दो प्रोटोप्लास्ट के मिलन के लिए पादप कोशिका भित्ति को हटाना आवश्यक होता है। पादप कोशिका भित्ति मुख्य रूप से सेलुलोज,हेमीसेलुलोज और पेक्टिन से बनी होती है। इसलिए,कोशिका भित्ति को पचाने और प्रोटोप्लास्ट को अलग करने के लिए $Cellulase$,$Hemicellulase$ और $Pectinase$ जैसे एंजाइमों के मिश्रण की आवश्यकता होती है।

(A) ऊतक संवर्धन पादप कोशिकाओं,ऊतकों या अंगों को एक बाँझ वातावरण में पोषक माध्यम पर उगाने की एक तकनीक है।
पोषक माध्यम (जैसे मुराशिग और स्कूग माध्यम) को एक्सप्लांट की वृद्धि और विकास के लिए सभी आवश्यक घटक प्रदान करने चाहिए।
इन घटकों में शामिल हैं:
$1$. कार्बन स्रोत: सुक्रोज सबसे अधिक उपयोग किया जाने वाला कार्बन स्रोत है।
$2$. अकार्बनिक लवण: खनिज पोषण (गुरु और सूक्ष्म पोषक तत्व) के लिए आवश्यक हैं।
$3$. वृद्धि नियामक: मॉर्फोजेनेसिस और कोशिका विभाजन को नियंत्रित करने के लिए ऑक्सिन और साइटोकिनिन जोड़े जाते हैं।
$4$. विटामिन: चयापचय प्रक्रियाओं के लिए आवश्यक हैं।
$5$. अमीनो एसिड: तेजी से विकास में सहायता के लिए अक्सर नाइट्रोजन स्रोत के रूप में जोड़े जाते हैं।
इसलिए,पोषक माध्यम में सूचीबद्ध सभी घटक ($I, II, III, IV$ और $V$) आवश्यक हैं।

(C) सोमाक्लोनल विभिन्नताएँ ऊतक संवर्धन से पुनर्जीवित पौधों में देखी जाने वाली आनुवंशिक विभिन्नताओं को संदर्भित करती हैं।
ये विभिन्नताएँ संवर्धन वातावरण के तनाव,विकास नियामकों के उपयोग,या संवर्धन की अवधि के कारण उत्पन्न होती हैं।
चूंकि ऊतक संवर्धन के माध्यम से उत्पादित पौधे मूल पौधे के क्लोन होते हैं,इसलिए इस प्रक्रिया के दौरान होने वाले किसी भी आनुवंशिक परिवर्तन को 'सोमाक्लोनल विभिन्नता' कहा जाता है।
अतः,इन विभिन्नताओं को प्राप्त करने की सही विधि ऊतक संवर्धन है।

(C) कायिक संकरण में दो अलग-अलग प्रजातियों के प्रोटोप्लास्ट का संलयन शामिल होता है,जिसके परिणामस्वरूप संकर का निर्माण होता है।
नग्न प्रोटोप्लास्ट को पेक्टिनेज और सेल्युलेज जैसे मैसेरेटिंग एंजाइमों का उपयोग करके उनकी कोशिका भित्ति को घोलकर प्राप्त किया जाता है।
दो अलग-अलग किस्मों के प्रोटोप्लास्ट के संलयन को उच्च वोल्टेज विद्युत धारा की उपस्थिति में पॉलीइथाइलीन ग्लाइकोल $(PEG)$ के साथ उपचारित करके बढ़ाया जा सकता है।

(D) मेरिस्टेम कल्चर एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग संक्रमित मूल पौधों से वायरस-मुक्त पौधे तैयार करने के लिए किया जाता है। शीर्षस्थ या कक्षीय मेरिस्टेम (विभज्योतक),जो आमतौर पर वायरस से मुक्त होता है,का संवर्धन करके स्वस्थ पौधों को पुनर्जीवित किया जा सकता है। इस तकनीक का उपयोग करके सफलतापूर्वक विकसित किए गए पौधों के उदाहरणों में $Banana$ (केला),$Sugarcane$ (गन्ना) और $Potato$ (आलू) शामिल हैं।

(A) टिश्यू कल्चर के माध्यम से हजारों पौधों का उत्पादन करने की विधि को माइक्रोप्रोपेगेशन कहा जाता है।
इनमें से प्रत्येक पौधा आनुवंशिक रूप से उस मूल पौधे के समान होगा जिससे उन्हें उगाया गया है,अर्थात,उन्हें सोमाक्लोन्स कहा जाता है।
टमाटर,केला,सेब आदि जैसे कई महत्वपूर्ण खाद्य पौधों का व्यावसायिक स्तर पर उत्पादन इस विधि का उपयोग करके किया गया है।

(D) पादप ऊतक संवर्धन (माइक्रोप्रोपेगेशन) द्वारा प्रवर्धन में कोशिकाओं,ऊतकों आदि का संवर्धन करके पौधों का विकास किया जाता है।
प्रारंभ में कोशिकाओं या ऊतकों के संवर्धन के परिणामस्वरूप कोशिकाओं का एक अविभेदित समूह बनता है जिसे $Callus$ (कैलस) कहा जाता है।
यह $Callus$ बाद में विभेदन (differentiation) के माध्यम से बड़ी संख्या में छोटे पौधे (plantlets) उत्पन्न करता है।

(A) सूक्ष्मप्रवर्धन (Micropropagation) पौधों के तीव्र गुणन के लिए उपयोग की जाने वाली एक ऊतक संवर्धन तकनीक है।
चूंकि इसमें कायिक प्रवर्धन या क्लोनिंग शामिल है,इसलिए उत्पन्न संतति आनुवंशिक रूप से जनक पौधे के समान होती है।
इन पौधों को 'ट्रू टू टाइप' (true to type) कहा जाता है क्योंकि वे जनक पौधे के सटीक आनुवंशिक लक्षणों को बनाए रखते हैं।
अतः,सही विकल्प $A$ है।

(C) एक पादप कोशिका की विभाजित होकर एक संपूर्ण नए पौधे में विभेदित होने की क्षमता को $Totipotency$ (पूर्णशक्तता) कहा जाता है।
यह जैविक घटना पादप ऊतक संवर्धन (plant tissue culture) और सूक्ष्मप्रवर्धन (micropropagation) का आधारभूत सिद्धांत है।
$Reproduction$ (प्रजनन) संतति उत्पन्न करने के लिए एक व्यापक शब्द है,$Budding$ (मुकुलन) अलैंगिक प्रजनन का एक विशिष्ट प्रकार है,और $Pleuripotency$ (बहुशक्तता) कोशिका की कई,लेकिन सभी प्रकार की कोशिकाओं में विभेदित होने की क्षमता को संदर्भित करता है।

(C) सोमाक्लोनल विभिन्नता उन आनुवंशिक विविधताओं को संदर्भित करती है जो ऊतक संवर्धन तकनीकों के माध्यम से उत्पादित पौधों में देखी जाती हैं।
ये विभिन्नताएँ संवर्धन वातावरण के तनाव,वृद्धि नियामकों के उपयोग,या संवर्धन की अवधि के कारण उत्पन्न होती हैं,जिससे पुनर्जीवित पौधों के आनुवंशिक मेकअप में मूल पौधे की तुलना में परिवर्तन हो जाता है।
इसलिए,ऊतक संवर्धन में उगाए गए पौधों में सोमाक्लोनल विभिन्नता दिखाई देती है।

(D) सूक्ष्मप्रवर्धन ऊतक संवर्धन के माध्यम से हजारों पौधों के उत्पादन की एक विधि है।
इस तकनीक में,उत्पादित पौधे आनुवंशिक रूप से उस मूल पौधे के समान होते हैं जिससे उन्हें उगाया गया था।
चूंकि ये पौधे आनुवंशिक रूप से जनक के समान होते हैं,इसलिए इन्हें सोमाक्लोनल पौधे कहा जाता है।

(B) केल्स (कोशिकाओं का एक अव्यवस्थित समूह) से व्यक्तिगत कोशिकाओं या कोशिकाओं के छोटे समूहों को अलग करके एक नया संवर्धन शुरू करने की प्रक्रिया को $Tissue \ culture$ (ऊतक संवर्धन) या विशेष रूप से $Cell \ culture$ (कोशिका संवर्धन) के रूप में जाना जाता है। पादप ऊतक संवर्धन में,एक्सप्लांट से केल्स प्रेरित किया जाता है,और इन कोशिकाओं को विकास का अध्ययन करने या पौधों के पुनरुद्धार के लिए अलग किया जा सकता है।

(B) पोमेटो,आलू ($Solanum$ $tuberosum$) और टमाटर ($Solanum$ $lycopersicum$) के प्रोटोप्लास्ट के संलयन द्वारा उत्पादित एक कायिक संकर (somatic hybrid) है। इस प्रक्रिया को कायिक संकरण (somatic hybridization) के रूप में जाना जाता है,जो पादप ऊतक संवर्धन में दो अलग-अलग प्रजातियों के आनुवंशिक पदार्थ को जोड़कर नई पादप किस्में बनाने के लिए उपयोग की जाने वाली एक तकनीक है।

(D) जंतुओं की तुलना में पादपों में आनुवंशिक अभियांत्रिकी द्वारा हेरफेर करना आसान है,जिसके कारण निम्नलिखित हैं:
$(i)$ पूर्णशक्तता (Totipotency): पादप कोशिकाओं में सभी प्रकार की कोशिकाओं में विभेदित होने की अंतर्निहित क्षमता होती है,जो पूरे जीव के पुनरुद्धार की अनुमति देती है।
$(ii)$ पुनरुद्धार (Regeneration): एक एकल कायिक कोशिका पूरे पादप शरीर को पुनर्जीवित कर सकती है,जो आमतौर पर जंतु कोशिकाओं में संभव नहीं है।
$(iii)$ ऊतक संवर्धन (Tissue Culture): पादपों में आनुवंशिक अभियांत्रिकी को पादप ऊतक संवर्धन तकनीकों द्वारा प्रभावी ढंग से पूरक किया जाता है,जो आनुवंशिक रूप से संशोधित कोशिकाओं के तेजी से गुणन की अनुमति देती हैं।

(A) कायिक संकरण एक ऐसी तकनीक है जिसमें दो अलग-अलग पादप प्रजातियों की कायिक कोशिकाओं को जोड़कर एक संकर बनाया जाता है।
इस प्रक्रिया में दोनों पौधों की कोशिकाओं से प्रोटोप्लास्ट का पृथक्करण शामिल है।
इसके बाद $PEG$ (पॉलीइथाइलीन ग्लाइकोल) या इलेक्ट्रोफ्यूजन जैसे कारकों का उपयोग करके प्रोटोप्लास्ट को संलयित किया जाता है।
परिणामी संकर प्रोटोप्लास्ट को फिर एक पूर्ण पौधे को पुनर्जीवित करने के लिए संवर्धित किया जाता है,जिसे कायिक संकर कहा जाता है।
इसलिए,सही विधि प्रोटोप्लास्ट संलयन है।