Tissue Culture Questions in Hindi

(A) पादप ऊतक संवर्धन में,सस्पेंशन कल्चर में तरल माध्यम में कोशिकाओं या कोशिकाओं के छोटे समूहों की वृद्धि शामिल होती है। कैलस में कोशिका विभाजन और प्रसार को प्रेरित करने के लिए,तरल माध्यम में विशिष्ट पादप वृद्धि नियामकों को मिलाया जाता है। ऑक्सिन,जैसे कि $2, 4-D$ ($2$,$4$-डाइक्लोरोफेनोक्सीएसेटिक एसिड),का उपयोग आमतौर पर सस्पेंशन कल्चर में कोशिका विभाजन और कैलस की वृद्धि को बढ़ावा देने के लिए किया जाता है।

(A) सस्पेंशन कल्चर में तरल माध्यम में कोशिकाओं का संवर्धन किया जाता है जहाँ उन्हें निरंतर गति में रखा जाता है। इस प्रक्रिया में,कोशिकाएं विभाजित होकर अविभेदित कोशिकाओं का एक समूह बनाती हैं जिसे कैलस (callus) या कोशिका समूह कहा जाता है। ये कोशिकाएं आमतौर पर अविभेदित होती हैं,जिसका अर्थ है कि वे अभी तक जाइलम या फ्लोएम जैसे विशिष्ट ऊतक प्रकारों में विभेदित नहीं हुई हैं। इसलिए,सही उत्तर $A$ है।

(A) सस्पेंशन कल्चर पादप ऊतक संवर्धन की एक तकनीक है जिसमें एकल कोशिकाओं या कोशिकाओं के छोटे समूहों को तरल पोषक माध्यम में फैलाया और उगाया जाता है।
यह विधि कोशिकाओं के तेजी से गुणन की अनुमति देती है और इसका उपयोग द्वितीयक मेटाबोलाइट्स के उत्पादन और आनुवंशिक परिवर्तन अध्ययन के लिए व्यापक रूप से किया जाता है।

(A) पादप ऊतक संवर्धन में,एक रोगाणु-मुक्त वातावरण बनाए रखना अत्यंत महत्वपूर्ण है। लैमिनर एयर फ्लो कैबिनेट में चिमटी (forceps),स्कैल्पेल और सुइयों जैसे उपकरणों को $UV$ प्रकाश (पराबैंगनी विकिरण) का उपयोग करके विसंक्रमित किया जाता है ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि वे सूक्ष्मजीव संदूषण से मुक्त हैं। $UV$ प्रकाश में कीटाणुनाशक गुण होते हैं जो सूक्ष्मजीवों के $DNA$ को प्रभावी ढंग से नष्ट कर देते हैं,जिससे उनकी वृद्धि रुक जाती है।

(C) अंतरजातीय संकरण में अक्सर भ्रूणपोष (endosperm) के विकास में विफलता होती है, जिससे संकर भ्रूण परिपक्व होने से पहले ही नष्ट हो जाता है। इस समस्या को दूर करने के लिए $Embryo \text{ } rescue$ (भ्रूण बचाव) तकनीक का उपयोग किया जाता है। इस विधि में, अपरिपक्व संकर भ्रूण को बीज से एसेप्टिक रूप से अलग किया जाता है और एक उपयुक्त पोषक माध्यम पर संवर्धित किया जाता है ताकि वह एक सक्षम पौधे में विकसित हो सके। अतः, ऐसे संकरण से संकर भ्रूण प्राप्त करने की सही विधि भ्रूण बचाव है।

(C) बीज से एक छोटे भ्रूण को अलग करके उसे निर्जर्मित स्थितियों में पोषक संवर्धन माध्यम पर उगाने की तकनीक को $Embryo$ $culture$ (भ्रूण संवर्धन) कहा जाता है।
इस तकनीक का उपयोग पादप ऊतक संवर्धन में बीज की प्रसुप्ति को दूर करने,असंगत संकरण से भ्रूण को बचाने,या उन पौधों के प्रसार के लिए व्यापक रूप से किया जाता है जिनके बीजों में अंकुरण दर कम होती है।

(D) ऊतक संवर्धन की प्रक्रिया एक्सप्लांट (पादप ऊतक का एक छोटा टुकड़ा) के चयन से शुरू होती है।
एक उपयुक्त पोषक माध्यम पर रखे जाने के बाद,एक्सप्लांट की कोशिकाएं तेजी से कोशिका विभाजन करती हैं।
अविभेदित और तेजी से विभाजित होने वाली कोशिकाओं के इस समूह को कैलस कहा जाता है।
आगे की वृद्धि या अंगजनन को प्रेरित करने के लिए,माध्यम में साइटोकाइनिन जैसे विशिष्ट पादप वृद्धि नियामक मिलाए जाते हैं।
अंत में,ये कोशिकाएं विभज्योतक या विशिष्ट ऊतकों में परिवर्तित होकर नए पादप बनाती हैं।
इसलिए,सही क्रम है: एक्सप्लांट $\rightarrow$ कोशिका विभाजन $\rightarrow$ कैलस $\rightarrow$ साइटोकाइनिन का योग $\rightarrow$ कोशिकाएं विभज्योतक ऊतक में परिवर्तित होती हैं।

(A) पादप ऊतक संवर्धन में,कैलस की वृद्धि के लिए संवर्धन माध्यम तैयार करने हेतु $Agar-agar$ (अगर-अगर) का उपयोग एक जमने वाले कारक (solidifying agent) के रूप में व्यापक रूप से किया जाता है। यह एक स्थिर,अर्ध-ठोस आधार प्रदान करता है जो कैलस को माध्यम में मौजूद आवश्यक पोषक तत्वों,विटामिनों और हार्मोन के संपर्क में रहते हुए विकसित होने की अनुमति देता है। $Agar-agar$ लाल शैवाल से प्राप्त होता है और इसे इसलिए प्राथमिकता दी जाती है क्योंकि यह पादप एंजाइमों द्वारा पचता नहीं है और ऊतक की वृद्धि में हस्तक्षेप नहीं करता है।

(B) पादप ऊतक संवर्धन के माध्यम से विकसित पौधे अपने मूल पौधे के आनुवंशिक रूप से समान होते हैं। इन्हें $Somaclones$ (सोमाक्लोन्स) कहा जाता है क्योंकि ये अलैंगिक प्रजनन (सूक्ष्मप्रवर्धन) के माध्यम से कायिक कोशिकाओं से उत्पन्न होते हैं। चूंकि ये क्लोन होते हैं,इसलिए इनमें जनक पौधे के समान ही आनुवंशिक संरचना होती है।

(C) कैलस संवर्धन पादप ऊतक संवर्धन की एक विधि है जिसमें कोशिकाओं का एक असंगठित समूह,जिसे कैलस कहा जाता है,बनता है।
समय के साथ,ये कोशिकाएं अंगजनन या कायिक भ्रूणजनन की प्रक्रिया के माध्यम से विभेदित होकर छोटे,विशिष्ट कोशिका समूह या अंग (जैसे प्ररोह या जड़) बनाती हैं।
अतः,कैलस संवर्धन वह मुख्य विधि है जिसमें अविभेदित कोशिका समूह विभेदित होकर विशिष्ट संरचनाओं का निर्माण करते हैं।

(B) भ्रूण संवर्धन (Embryo rescue) $\text{पादप } \text{ऊतक } \text{संवर्धन}$ (Plant tissue culture) में उपयोग की जाने वाली एक तकनीक है, जो उन भ्रूणों के विकास में सहायता करती है जो अन्यथा जीवित नहीं रह पाते हैं。
यह विशेष रूप से $\text{अंतरजातीय } \text{संकरण}$ (Interspecific hybridization) में उपयोगी है, जहाँ भ्रूण अक्सर भ्रूणपोष (endosperm) की असंगति या अन्य विकासात्मक बाधाओं के कारण नष्ट हो जाते हैं。
हालाँकि इसका उपयोग अंतरजातीय संकरण को सुविधाजनक बनाने के लिए किया जाता है, लेकिन यह तकनीक स्वयं $\text{पादप } \text{ऊतक } \text{संवर्धन}$ तकनीक का एक मूलभूत हिस्सा है。

(B) पादप ऊतक संवर्धन में,जब पादप कोशिकाओं को पोषक माध्यम पर उगाया जाता है,तो वे तेजी से विभाजित होकर कोशिकाओं का एक असंगठित और अविभेदित समूह बनाती हैं। इस समूह को $Callus$ (कैलस) कहा जाता है।

(D) पादप ऊतक संवर्धन (Plant tissue culture) उन तकनीकों का एक समूह है जिनका उपयोग पादप कोशिकाओं,ऊतकों या अंगों को निर्जर्मित स्थितियों में ज्ञात संरचना वाले पोषक माध्यम पर उगाने के लिए किया जाता है।
पादप ऊतक संवर्धन की सामान्य विधियों में शामिल हैं:
$1$. कैलस संवर्धन: ठोस माध्यम पर कोशिकाओं के असंगठित समूह (कैलस) को संवर्धित करना।
$2$. सस्पेंशन संवर्धन: तरल माध्यम में कोशिकाओं या कोशिकाओं के छोटे समूहों को संवर्धित करना।
$3$. भ्रूण संवर्धन: पूर्ण पादप उत्पन्न करने के लिए अलग किए गए भ्रूण को संवर्धित करना।
चूंकि ये सभी पादप जैव प्रौद्योगिकी में स्थापित तकनीकें हैं,इसलिए सही उत्तर $D$ है।

(D) पादप ऊतक संवर्धन एक ज्ञात संरचना वाले पोषक माध्यम पर बाँझ (sterile) वातावरण में पादप कोशिकाओं,ऊतकों या अंगों को बनाए रखने और उगाने की एक तकनीक है।
यह 'पूर्णशक्तता' (totipotency) के सिद्धांत पर आधारित है,जो एक पादप कोशिका की पूर्ण पौधे में पुनर्जीवित होने की क्षमता है।
इसलिए,विकल्प $D$ सबसे व्यापक और सटीक परिभाषा है क्योंकि इसमें कोशिकाएं,ऊतक और अंग शामिल हैं,साथ ही रखरखाव और वृद्धि के पहलू भी शामिल हैं।

(D) पादप ऊतक संवर्धन में,पादप का वह भाग जिसे काटकर संवर्धन शुरू करने के लिए उपयोग किया जाता है,उसे $Explant$ (कर्तक) कहा जाता है।
यह पादप का कोई भी हिस्सा हो सकता है,जैसे कि पत्ती का टुकड़ा,तना,जड़ या एक एकल कोशिका भी।
जब इसे निर्जर्मित (sterile) परिस्थितियों में उपयुक्त पोषक माध्यम पर रखा जाता है,तो $Explant$ विभाजित होकर और वृद्धि करके अविभेदित कोशिकाओं का एक समूह बनाता है जिसे $Callus$ (कैलस) कहा जाता है।

(A) ऊतक संवर्धन की प्रक्रिया में,सूक्ष्मजीवों द्वारा संदूषण को रोकने के लिए एक रोगाणुहीन वातावरण बनाए रखना महत्वपूर्ण है।
ऊतक संवर्धन में उपयोग किए जाने वाले उपकरण,जैसे कि चिमटी (forceps),स्कैल्पेल और सुइयां,आमतौर पर ऑटोक्लेव (उच्च दबाव और तापमान) द्वारा या लौ पर गर्म करके विसंक्रमित किए जाते हैं।
हालाँकि,ऊतक संवर्धन के लिए उपयोग किए जाने वाले लैमिनर एयरफ्लो कैबिनेट के संदर्भ में,प्रक्रिया शुरू करने से पहले कार्य सतह और कैबिनेट के अंदर की हवा को विसंक्रमित करने के लिए आमतौर पर $UV$ (पराबैंगनी) प्रकाश का उपयोग किया जाता है।
इसलिए,दिए गए विकल्पों में से,इस संदर्भ में विसंक्रमण के लिए $UV$ प्रकाश सही विधि है।

(C) पादप ऊतक संवर्धन में,विशेष रूप से कैलस प्रेरण और अंगजनन के दौरान,$Auxin$ (ऑक्सिन) और $Cytokinin$ (साइटोकाइनिन) के बीच का संतुलन अत्यंत महत्वपूर्ण होता है।
$Auxin$ जड़ के विकास को बढ़ावा देता है,जबकि $Cytokinin$ प्ररोह (shoot) के विकास को बढ़ावा देता है।
संवर्धन माध्यम में इन दोनों हार्मोन के अनुपात में हेरफेर करके,शोधकर्ता कैलस के जड़,प्ररोह या भ्रूण में विभेदन को नियंत्रित कर सकते हैं।
इसलिए,माध्यम में उपयोग किया जाने वाला सही संयोजन $Cytokinin$ और $Auxin$ है।

(B) पादप ऊतक संवर्धन में,कोशिका विभाजन को प्रेरित करने के लिए एक्सप्लांट को पोषक माध्यम पर रखा जाता है। कैलस,जो कोशिकाओं का एक असंगठित समूह है,का निर्माण आमतौर पर नियंत्रित परिस्थितियों में $2$ से $3$ सप्ताह के इनक्यूबेशन के बाद होता है।

(A) सस्पेंशन कल्चर (Suspension culture) एक ऐसी तकनीक है जिसमें एकल कोशिकाओं या कोशिकाओं के छोटे समूहों को तरल माध्यम में निलंबित किया जाता है और उन्हें बिखरी हुई स्थिति में बनाए रखने के लिए हिलाया जाता है।
यह विधि कोशिकाओं की तीव्र वृद्धि की अनुमति देती है और इसका उपयोग पादप ऊतक संवर्धन में द्वितीयक मेटाबोलाइट्स और बायोमास के उत्पादन के लिए व्यापक रूप से किया जाता है।
इसके विपरीत,कैलस कल्चर में कोशिकाओं को ठोस माध्यम पर उगाया जाता है,और भ्रूण कल्चर में भ्रूण का अलगाव और विकास किया जाता है।

(B) पादप ऊतक संवर्धन में,विशेष रूप से सस्पेंशन कल्चर (निलंबन संवर्धन) में,माध्यम में $2,4-D$ (एक कृत्रिम $Auxin$) को सामान्यतः मिलाया जाता है।
$Auxins$ कोशिका विभाजन को प्रेरित करने और कैलस या कोशिका निलंबन की वृद्धि को बढ़ावा देने के लिए आवश्यक हैं।
यद्यपि $Cytokinins$ का भी उपयोग किया जाता है,लेकिन सस्पेंशन कल्चर की वृद्धि को शुरू करने और बनाए रखने के लिए $Auxins$ प्राथमिक वृद्धि नियामक हैं।

(B) सस्पेंशन संवर्धन में कोशिकाओं या कोशिकाओं के छोटे समूहों को तरल माध्यम में लगातार हिलाकर उगाया जाता है।
निरंतर गति और प्रत्येक कोशिका को पोषक तत्वों और ऑक्सीजन की बेहतर उपलब्धता के कारण,सस्पेंशन संवर्धन में वृद्धि की दर कैलस संवर्धन की तुलना में काफी तेज होती है,क्योंकि कैलस संवर्धन को ठोस माध्यम पर उगाया जाता है जहाँ पोषक तत्वों का प्रसार धीमा होता है।

(A) पादप ऊतक संवर्धन में, $Suspension \text{ culture}$ (सस्पेंशन कल्चर) में तरल माध्यम में एकल कोशिकाओं या कोशिकाओं के छोटे समूहों का विकास किया जाता है। इस विधि में $rotary \text{ shaker}$ (रोटरी शेकर) आवश्यक है जो निरंतर हलचल प्रदान करता है, जिससे उचित वातन (aeration) और पोषक तत्वों का वितरण सुनिश्चित होता है और कोशिकाओं को आपस में जुड़ने से रोका जाता है।

(C) सस्पेंशन कल्चर में, कोशिकाओं या कोशिका समूहों को तरल माध्यम में उगाया जाता है।
उचित वातन (aeration) सुनिश्चित करने और कोशिकाओं को नीचे बैठने से रोकने के लिए, कल्चर फ्लास्क को रोटरी शेकर पर रखा जाता है।
रोटरी शेकर को आमतौर पर $100$ से $250\, rpm$ (रिवोल्यूशन प्रति मिनट) की गति पर संचालित किया जाता है।
यह निरंतर हलचल माध्यम में पोषक तत्वों और ऑक्सीजन के समान वितरण को बनाए रखने में मदद करती है।

(C) $\text{कैलस}$ $\text{संवर्धन}$ ($Callus$ $culture$) में, एक्सप्लांट (पादप ऊतक का एक टुकड़ा) को पोषक माध्यम पर रखा जाता है। कोशिकाएं विभाजित होकर कोशिकाओं का एक असंगठित समूह बनाती हैं जिसे $\text{कैलस}$ कहा जाता है। विशिष्ट हार्मोनल स्थितियों के तहत, $\text{कैलस}$ में ये कोशिका समूह विभेदित होकर छोटे, विशिष्ट कोशिका समूह या अंग (जैसे प्ररोह या जड़) बनाते हैं, इस प्रक्रिया को अंगजनन (organogenesis) कहा जाता है।

(A) मौजूदा संवर्धन के एक हिस्से को नए माध्यम या नए कांच के उपकरणों में स्थानांतरित करने की प्रक्रिया को $Subculturing$ (उपसंवर्धन) कहा जाता है। यह सूक्ष्मजीव विज्ञान और पादप ऊतक संवर्धन में कोशिकाओं या सूक्ष्मजीवों की निरंतर वृद्धि और गुणन को बनाए रखने के लिए एक मानक प्रक्रिया है।

(C) कैलस और सस्पेंशन कल्चर का उपयोग मुख्य रूप से द्वितीयक मेटाबोलाइट्स के उत्पादन,प्रोटोप्लास्ट के पृथक्करण,कोशिका बायोमास के उत्पादन और त्वरित क्लोनल प्रसार (माइक्रोप्रोपैगेशन) के लिए किया जाता है।
प्रांकुरों का पुनरुद्भवन एक विशिष्ट विकासात्मक प्रक्रिया है जो आमतौर पर कायिक भ्रूणजनन (somatic embryogenesis) या संगठित ऊतकों से अंगजनन के दौरान होती है। इसे अविभेदित कैलस या सस्पेंशन कल्चर सिस्टम का प्राथमिक अनुप्रयोग या उद्देश्य नहीं माना जाता है,क्योंकि इन प्रणालियों का मुख्य उद्देश्य कोशिकाओं को असंगठित अवस्था में बनाए रखना है।

(C) पादप ऊतक संवर्धन की प्रक्रिया में कई चरण शामिल होते हैं।
$A$. चयनित एक्सप्लांट को उपयुक्त संवर्धन माध्यम में रखना इनोक्यूलेशन का प्रारंभिक चरण है।
$B$. सस्पेंशन कल्चर में,कोशिका विभाजन और वृद्धि को बढ़ावा देने के लिए $2,4-D$ (एक सिंथेटिक ऑक्सिन) जैसे वृद्धि नियामक अक्सर जोड़े जाते हैं।
$C$. कैलस कल्चर में,कैलस निर्माण के लिए आमतौर पर ऑक्सिन और साइटोकाइनिन के संतुलन का उपयोग किया जाता है,न कि केवल जिबरेलिन और ऑक्सिन का।
$D$. संवर्धन के एक हिस्से को नए कांच के बर्तनों में ताजे माध्यम में स्थानांतरित करने की प्रक्रिया को उप-संवर्धन कहा जाता है।
इसलिए,कथन $C$ असत्य है क्योंकि कैलस प्रेरण के लिए ऑक्सिन के साथ साइटोकाइनिन की मुख्य आवश्यकता होती है।

(B) बीज से भ्रूण को अलग करके उसे निर्जर्मित (aseptic) परिस्थितियों में पोषक माध्यम पर उगाने की प्रक्रिया को $Embryo \ culture$ (भ्रूण संवर्धन) कहा जाता है। इस तकनीक का उपयोग अक्सर बीज की प्रसुप्ति (dormancy) को दूर करने,असंगत संकरण से भ्रूण को बचाने या दुर्लभ पौधों के प्रवर्धन के लिए किया जाता है।

(B) भ्रूण संवर्धन (Embryo culture) एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग बीज की सुप्तावस्था को दूर करने और उन बीजों से भ्रूण को बचाने के लिए किया जाता है जो विभिन्न कारणों (जैसे लंबी सुप्तावस्था या असंगति) से अंकुरित होने में विफल रहते हैं। भ्रूण को अलग करके और उसे नियंत्रित परिस्थितियों में उपयुक्त पोषक माध्यम प्रदान करके,प्रांकुर और मूलांकुर के विकास को प्रेरित किया जा सकता है,जिससे एक पूर्ण पौधे का निर्माण होता है।

(D) भ्रूण संवर्धन पादप ऊतक संवर्धन की एक तकनीक है जिसमें बीज से भ्रूण को अलग करके पोषक माध्यम में उगाया जाता है।
$1$. इसका उपयोग तेजी से क्लोनल प्रसार के लिए किया जाता है ताकि बड़ी संख्या में आनुवंशिक रूप से समान पौधे उत्पन्न किए जा सकें।
$2$. यह आनुवंशिक इंजीनियरिंग में आनुवंशिक रूप से संशोधित $(GM)$ पौधों के उत्पादन के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण के रूप में कार्य करता है।
$3$. इसका उपयोग बीज प्रसुप्ति और असंगति बाधाओं को दूर करने के लिए किया जाता है,जिससे नई और उपयोगी किस्मों के विकास में मदद मिलती है।
अतः,उपरोक्त सभी उद्देश्य भ्रूण संवर्धन के अनुप्रयोग हैं।

(D) भ्रूण संवर्धन ऊतक संवर्धन तकनीक का एक प्रकार है जिसका उपयोग उन भ्रूणों को बचाने के लिए किया जाता है जो अन्यथा प्राकृतिक रूप से (in vivo) विकसित होने में विफल हो सकते हैं।
इसके प्राथमिक उद्देश्यों में बीज की सुप्त अवस्था को दूर करना,संकर भ्रूणों को बचाना और अगुणित पौधों का उत्पादन करना शामिल है।
$A$,$B$,और $C$ पादप ऊतक संवर्धन तकनीकों के मानक अनुप्रयोग हैं।
$D$ (उपयोगी प्रजातियों का निर्माण) सामान्य रूप से पादप प्रजनन और जैव प्रौद्योगिकी का एक व्यापक लक्ष्य है,लेकिन यह भ्रूण संवर्धन प्रक्रिया का एक विशिष्ट तकनीकी उद्देश्य नहीं है,क्योंकि भ्रूण संवर्धन विशिष्ट भ्रूणों के विकास में सहायता करने के लिए एक उपकरण है,न कि शून्य से नई प्रजातियां बनाने की विधि।

(B) सही मिलान इस प्रकार है:
$1$. $(a)$ $UV$ प्रकाश का उपयोग लैमिनर एयरफ्लो कैबिनेट के निर्जमीकरण (sterilization) के लिए किया जाता है ताकि एक रोगाणु-मुक्त वातावरण बना रहे: $(a-r)$।
$2$. $(b)$ जीवद्रव्यक (protoplast) पृथक्करण में सेल्युलेज और पेक्टिनेज जैसे एंजाइमों का उपयोग किया जाता है, जो कैलस संवर्धन का एक महत्वपूर्ण चरण है: $(b-s)$।
$3$. $(c)$ ऑर्किड के बीज बहुत छोटे होते हैं और उनमें भ्रूणपोष का अभाव होता है, इसलिए उनके अंकुरण के लिए भ्रूण संवर्धन की आवश्यकता होती है: $(c-p)$।
$4$. $(d)$ कर्तोतक (explant) पौधे का कोई भी भाग है जिसे काटकर विशेष पोषक माध्यम में निर्जमीकृत परिस्थितियों में उगाया जाता है: $(d-q)$।
अतः, सही क्रम $(a-r), (b-s), (c-p), (d-q)$ है।

(A) कैलस $(Callus)$ शब्द कोशिकाओं के एक असंगठित या अविभेदित समूह को संदर्भित करता है जो बाँझ परिस्थितियों में पोषक माध्यम पर उगाए जाने पर एक्सप्लांट (पादप ऊतक) से विकसित होता है।
कैलस के निर्माण को प्रेरित करने और इसकी वृद्धि का समर्थन करने के लिए,संवर्धन माध्यम में विशिष्ट पादप वृद्धि नियामक,मुख्य रूप से ऑक्सिन $(Auxin)$ और साइटोकाइनिन $(Cytokinin)$ मिलाए जाते हैं।
चूंकि इन हार्मोन का योग ही वह विशिष्ट कारण है जिसके कारण ऊतक संवर्धन में अविभेदित समूह (कैलस) बनता है और बना रहता है,इसलिए $R$,$S$ की सही व्याख्या प्रदान करता है।

(B) भ्रूण-संवर्धन (Embryo culture) एक ऐसी तकनीक है जिसका उपयोग उन बीजों से भ्रूण को बचाने के लिए किया जाता है जो लंबे समय तक सुप्त अवस्था में रहते हैं या प्राकृतिक परिस्थितियों में अंकुरित होने में विफल रहते हैं। भ्रूण को अलग करके और उसे नियंत्रित परिस्थितियों में पोषक तत्वों से भरपूर संवर्धन माध्यम पर रखकर,सुप्तता को तोड़ा जा सकता है और भ्रूण को अंकुर के रूप में विकसित होने के लिए प्रेरित किया जा सकता है। यह तकनीक विशेष रूप से पादप प्रजनन और दुर्लभ प्रजातियों के संरक्षण में उपयोगी है।

(B) पादप ऊतक संवर्धन पादप कोशिकाओं,ऊतकों या अंगों को एक बाँझ (sterile) और नियंत्रित वातावरण में उगाने की एक तकनीक है।
$1$. उपकरणों का स्टरलाइजेशन आमतौर पर ऑटोक्लेव (उच्च दबाव और भाप) या रासायनिक कीटाणुनाशकों द्वारा किया जाता है,न कि अवरक्त प्रकाश द्वारा।
$2$. ऊतक संवर्धन के लिए तापमान आमतौर पर $20^{\circ}C$ से $28^{\circ}C$ के बीच बनाए रखा जाता है,इसलिए $24^{\circ}C$ तापमान एक्सप्लांट की वृद्धि के लिए एक उपयुक्त और सुसंगत स्थिति है।
$3$. एक्सप्लांट को आमतौर पर केवल तरल माध्यम के बजाय एक ठोस या अर्ध-ठोस पोषक माध्यम (अगर-आधारित) पर रखा जाता है ताकि उन्हें संरचनात्मक समर्थन मिल सके।
$4$. हालांकि शांत वातावरण अच्छा है,लेकिन यह संवर्धन प्रक्रिया की सफलता के लिए कोई तकनीकी आवश्यकता नहीं है।
इसलिए,एक्सप्लांट को $24^{\circ}C$ पर बनाए रखना ऊतक संवर्धन में एक मानक अभ्यास है।

(A) कैलस सक्रिय रूप से विभाजित होने वाली कोशिकाओं का एक असंगठित समूह है जिसे संवर्धन (culture) में बनाए रखा जाता है।
प्रयोगशाला में कैलस को बनाए रखने के लिए, माध्यम को संरचनात्मक आधार प्रदान करने के लिए एक जमने वाले कारक (solidifying agent) की आवश्यकता होती है।
अगर-अगर, जो समुद्री शैवाल से प्राप्त होता है, पादप ऊतक संवर्धन माध्यम में सबसे अधिक उपयोग किया जाने वाला जेलिंग एजेंट है क्योंकि यह निष्क्रिय और स्थिर होता है, और यह कैलस को बढ़ने के लिए एक मजबूत सतह प्रदान करता है।
इसलिए, कैलस के रखरखाव के लिए अगर-अगर जेल सही माध्यम घटक है।

(A) पादप ऊतक संवर्धन में,कैलस कोशिकाओं का एक अविभेदित समूह होता है। कैलस से प्ररोह (shoot) और जड़ के विकास को प्रेरित करने के लिए,संवर्धन माध्यम में विशिष्ट पादप वृद्धि नियामकों को मिलाया जाता है। साइटोकाइनिन मुख्य रूप से कैलस संवर्धन में कोशिका विभाजन और प्ररोह विभेदन को बढ़ावा देने के लिए जिम्मेदार होते हैं। इसलिए,साइटोकाइनिन माध्यम में मिलाया जाने वाला आवश्यक वृद्धि-प्रेरक है।

(A) सस्पेंशन-संवर्धन में,कल्चर माध्यम को रोटरी शेकर का उपयोग करके लगातार हिलाया जाता है। यह प्रक्रिया मुख्य रूप से दो कारणों से आवश्यक है:
$1$. यह उचित वातन (aeration) सुनिश्चित करता है,जो कल्चर माध्यम और वातावरण के बीच $O_2$ और $CO_2$ जैसी गैसों के आदान-प्रदान को सुगम बनाता है।
$2$. यह पूरे माध्यम में पोषक तत्वों और कोशिकाओं का समान वितरण सुनिश्चित करता है,जिससे कोशिकाएं नीचे न बैठें।
अतः,इसका मुख्य उद्देश्य गैसों के आदान-प्रदान को सुगम बनाना और एक समान वातावरण बनाए रखना है।

(D) पादप ऊतक संवर्धन (Plant tissue culture) नियंत्रित पर्यावरणीय परिस्थितियों में एक बाँझ,पोषक तत्वों से भरपूर संवर्धन माध्यम में पादप कोशिकाओं,ऊतकों या अंगों को उगाने की एक तकनीक है।
इस प्रक्रिया में,एक्सप्लांट (संवर्धन के लिए उपयोग किया जाने वाला पादप का हिस्सा) कोशिका विभाजन और विभेदन से गुजरता है।
जैसे-जैसे कोशिकाएं विभाजित होती हैं और बढ़ती हैं,वे अविभेदित कोशिकाओं का एक समूह बनाती हैं जिसे 'कैलस' (Callus) कहा जाता है।
परिणामस्वरूप,इस तकनीक का मुख्य उद्देश्य और आवश्यक घटना कोशिकाओं का प्रसार है,जिससे कोशिकाओं या ऊतकों के जैवभार (biomass) में वृद्धि होती है।

(C) भ्रूण बचाव (Embryo rescue) पादप ऊतक संवर्धन की एक तकनीक है जिसका उपयोग उन भ्रूणों के विकास में सहायता के लिए किया जाता है जो अन्यथा परिपक्व होने में विफल हो सकते हैं।
यह विशेष रूप से अंतरजातीय (interspecific) या अंतर-जेनेरिक (intergeneric) संकरण से प्राप्त भ्रूणों से व्यवहार्य पौधे प्राप्त करने के लिए उपयोगी है,जहाँ भ्रूण अक्सर भ्रूणपोष (endosperm) की विफलता के कारण नष्ट हो जाते हैं।
इस तकनीक का प्राथमिक अनुप्रयोग इन अपरिपक्व या संकर भ्रूणों से पादपों (plantlets) का पुनरुद्धार करना है,जो प्राकृतिक परिस्थितियों में जीवित नहीं रह पाते।

(D) पादप ऊतक संवर्धन (Plant tissue culture) में,कैलस को अविभेदित कोशिकाओं के एक असंगठित समूह के रूप में परिभाषित किया जाता है,जो पोषक माध्यम पर संवर्धित किए गए एक्सप्लांट (पादप ऊतक का एक टुकड़ा) से विकसित होता है।
ये कोशिकाएं सक्रिय रूप से विभाजित हो रही होती हैं लेकिन अभी तक विशिष्ट पादप ऊतकों या अंगों में परिवर्तित नहीं हुई होती हैं।
उपयुक्त हार्मोनल स्थितियों के तहत,कैलस को प्ररोह (shoots),जड़ों या कायिक भ्रूणों (somatic embryos) में विभेदित होने के लिए प्रेरित किया जा सकता है।

(A) पादप ऊतक संवर्धन में,कैलस पोषक माध्यम पर उगाए गए कोशिकाओं का एक अविभेदित समूह है।
वृद्धि और विभेदन को प्रेरित करने के लिए,माध्यम में विशिष्ट पादप वृद्धि नियामक मिलाए जाते हैं।
ऑक्सिन और साइटोकाइनिन ऊतक संवर्धन में उपयोग किए जाने वाले सबसे महत्वपूर्ण पादप हार्मोन हैं।
ऑक्सिन कोशिका दीर्घीकरण और जड़ निर्माण को बढ़ावा देते हैं,जबकि साइटोकाइनिन कोशिका विभाजन (साइटोकाइनेसिस) और प्ररोह निर्माण को बढ़ावा देते हैं।
इसलिए,दोनों कथन वैज्ञानिक रूप से सटीक हैं क्योंकि वे वृद्धि प्रमोटर के रूप में कार्य करते हैं और संवर्धन में कोशिका विभाजन की शुरुआत करते हैं।

(B) कथन $(i)$ सही है: कैलस का निर्माण आमतौर पर संवर्धन शुरू होने के $2$ से $3$ सप्ताह के भीतर होता है।
कथन $(ii)$ गलत है: कैलस-संवर्धन की तुलना में सस्पेंशन-संवर्धन में आमतौर पर तीव्र वृद्धि देखी जाती है क्योंकि कोशिकाएं पोषक माध्यम के सीधे संपर्क में होती हैं।
कथन $(iii)$ सही है: ऑर्किड के बीज बहुत सूक्ष्म होते हैं और उनमें भ्रूणपोष या संचित भोजन का अभाव होता है,जिसके कारण अंकुरण के लिए उन्हें सहजीवी कवक की आवश्यकता होती है।
कथन $(iv)$ गलत है: $2,4-D$ (एक कृत्रिम ऑक्सिन) का उपयोग कोशिका विभाजन और वृद्धि को बढ़ावा देने के लिए कैलस-संवर्धन और सस्पेंशन-संवर्धन दोनों में व्यापक रूप से किया जाता है।
अतः,कथन $(ii)$ और $(iv)$ गलत हैं।

(C) सही मिलान इस प्रकार है:
$(i)$ कैलस संवर्धन: यह एक्सप्लांट से प्राप्त कोशिकाओं का एक असंगठित,अविभेदित द्रव्यमान है। अतः,$(i-C)$।
$(ii)$ सस्पेंशन संवर्धन: इसमें तरल माध्यम में कोशिकाओं की वृद्धि शामिल है,जो अक्सर विभेदित द्रव्यमान या विशिष्ट प्रकार की कोशिकाओं में परिणत होती है। अतः,$(ii-B)$।
$(iii)$ भ्रूण संवर्धन: इसका उपयोग मुख्य रूप से संकर भ्रूणों (hybrid embryos) को बचाने के लिए किया जाता है जो अन्यथा प्राकृतिक रूप से विकसित होने में विफल हो सकते हैं। अतः,$(iii-A)$।
इसलिए,सही क्रम $(i-C, ii-B, iii-A)$ है।

(A) पादप ऊतक संवर्धन में,कैलस का अंगों में विभेदन (अंगजनन) माध्यम में मौजूद पादप वृद्धि नियामकों के अनुपात द्वारा नियंत्रित होता है।
विशेष रूप से,$Cytokinin$ की तुलना में $Auxin$ की उच्च सांद्रता जड़ों के विकास (मूलजनन) को बढ़ावा देती है।
इसके विपरीत,$Auxin$ की तुलना में $Cytokinin$ की उच्च सांद्रता प्ररोह के विकास (प्ररोहजनन) को बढ़ावा देती है।
इसलिए,कैलस-संवर्धन में जड़ निर्माण को प्रेरित करने के लिए $Auxin$ जिम्मेदार है।

(D) पादप ऊतक संवर्धन (Plant tissue culture) में,कोशिका विभाजन और जड़ निर्माण को प्रेरित करने के लिए ऑक्सिन आवश्यक होते हैं।
$NAA$ (नेफ्थलीन एसिटिक एसिड),$IBA$ (इंडोल$-3-$ब्यूटिरिक एसिड),और $2,4-D$ ($2$,$4$-डाइक्लोरोफिनॉक्सी एसिटिक एसिड) सभी कृत्रिम ऑक्सिन हैं जिनका प्रयोगशालाओं में व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।
इन ऑक्सिन का उपयोग सामान्यतः कैलस प्रेरण और सस्पेंशन कल्चर दोनों के माध्यमों में वृद्धि और मॉर्फोजेनेसिस को बढ़ावा देने के लिए किया जाता है।
अतः,सूचीबद्ध सभी ऑक्सिन इन संवर्धन तकनीकों के लिए मानक विकल्प हैं।

(D) कैलस और सस्पेंशन कल्चर पादप ऊतक संवर्धन की मूलभूत तकनीकें हैं।
$1$. प्ररोहों का पुनरुद्भवन: विशिष्ट हार्मोनल स्थितियों के तहत कैलस को प्ररोहों (अंगजनन) में विभेदित किया जा सकता है।
$2$. कोशिका बायोमास का उत्पादन: सस्पेंशन कल्चर तरल माध्यम में कोशिकाओं की तीव्र वृद्धि की अनुमति देते हैं,जिसका उपयोग द्वितीयक मेटाबोलाइट्स या बायोमास के बड़े पैमाने पर उत्पादन के लिए किया जाता है।
$3$. प्रोटोप्लास्ट का पृथक्करण: कैलस और सस्पेंशन कल्चर प्रोटोप्लास्ट (कोशिका भित्ति रहित कोशिकाएं) को अलग करने के लिए उत्कृष्ट स्रोत हैं,जिनका उपयोग आनुवंशिक इंजीनियरिंग और कायिक संकरण में किया जाता है।
अतः,दिए गए सभी विकल्प सही हैं।

(C) सही मिलान इस प्रकार है:
$(1)$ कैलस संवर्धन: कैलस पादप ऊतक संवर्धन से प्राप्त कोशिकाओं का एक असंगठित,अविभेदित द्रव्यमान है। अतः,$(1)-(R)$।
$(2)$ सस्पेंशन संवर्धन: इसमें तरल माध्यम में कोशिकाओं या कोशिकाओं के छोटे समूहों की वृद्धि शामिल है,जो अक्सर विभेदित द्रव्यमान में परिणत होती है। अतः,$(2)-(Q)$।
$(3)$ भ्रूण संवर्धन: इस तकनीक का उपयोग उन भ्रूणों को बचाने के लिए किया जाता है जो अन्यथा विकसित होने में विफल हो सकते हैं,जिसका उपयोग अक्सर संकर भ्रूण बचाव (Hybrid embryo rescue) में किया जाता है। अतः,$(3)-(P)$।
इसलिए,सही क्रम $(1)-(R), (2)-(Q), (3)-(P)$ है।

(A) $A:$ सस्पेंशन संवर्धन में तरल माध्यम में एकल कोशिकाओं या कोशिकाओं के छोटे समूहों की वृद्धि होती है,जो ठोस कैलस संवर्धन की तुलना में पोषक तत्वों के तेज अवशोषण और तीव्र वृद्धि की अनुमति देता है।
$R:$ रोटरी शेकर का उपयोग निरंतर हलचल प्रदान करता है,जो पोषक तत्वों का समान वितरण सुनिश्चित करता है और कोशिकाओं के लिए ऑक्सीजन की उपलब्धता (वातन) में सुधार करता है,जिससे वृद्धि तेज होती है।
चूंकि सस्पेंशन संवर्धन में तीव्र वृद्धि सीधे रोटरी शेकर द्वारा प्रदान किए गए बेहतर पोषक मिश्रण और वातन द्वारा सुगम होती है,इसलिए $R$,$A$ की सही व्याख्या है।

(A) पादप ऊतक संवर्धन में,एक्सप्लांट को आवश्यक खनिजों,विटामिनों और कार्बन स्रोतों वाले पोषक माध्यम पर उगाया जाता है।
जैसे-जैसे कोशिकाएं या ऊतक बढ़ते और विभाजित होते हैं,वे अपनी चयापचय गतिविधियों के लिए और अपने जैवभार को बढ़ाने के लिए माध्यम से इन पोषक तत्वों का उपभोग करते हैं।
इसलिए,माध्यम में पोषक तत्वों की कमी $(A)$ संवर्धित कोशिकाओं या ऊतकों की तीव्र वृद्धि और जैवभार में वृद्धि $(R)$ का सीधा परिणाम है।
अतः,$R$,$A$ की सही व्याख्या है।